原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

涂片法：

1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液；
3. 载玻片在空气中干燥后，再用甲醇固定；
5. 注意，为避免细胞皱缩应尽快使涂有细胞的载玻片干燥，可摇动载玻片或用吹风机的冷风迅速吹干；

离心法：

1. 需使用离心涂片机将细胞悬液的细胞直接离心沉淀在载玻片上，使细胞的离心沉淀和涂片同时进行；
3. 将滤纸片孔对准出孔，然后插入机头凹槽内，用弹簧片顶紧，使滤纸片夹于标本室的出孔与载玻片之间；
5. 离心完毕后自动关机。取出载玻片在空气中干燥后；

真空过滤法：

1. 用含有10%血清的培养液将培养物调制成浓度为106个/ml的细胞悬液；
3. 当过滤悬液还剩余2ml左右时，轻轻加入110ml平衡盐溶液继续过滤，到
4. 然后加10ml甲醇到平衡盐溶液中，一直重复到过滤出的液体是纯甲醇为止；

染液制备：

1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油；
3. 将剩余的甘油倒入研钵，于56℃保温2h；
5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen缓冲液和1份吉姆萨母液混合即得染色液；
8. 移除染液，用自来水冲洗掉粉红色背景后，再用去离子水冲洗细胞；

结果：

细胞核被染成紫红色或紫蓝色，而细胞质则被染成浅红色；

注意事项：

1. 染液宜现用现配，旧染液染色效果不佳。染液保存时间不宜超过48h；