技术文章库
人工合成的抗氧化剂有 ：
（2） BHA 叔丁基对羟基茴醚
近几年也合成了一些新的抗氧化剂如TBHQ, DBHA等还有一些新的天然抗氧化剂，但投入使用的不多。
特点：
2）在弱碱性中不破坏（作为焙烤食品用的抗氧化剂）
⑵ 2，6-二叔丁基对甲酚结构
这种抗氧化剂在美国是禁止使用的
特点 ：（1）耐热性强；（2）溶于油脂，酒精等有机溶剂中
我们从以上三种氧化剂结构中可以看出，它们都有苯酚，所以我们要找抗氧化剂必须找酚类衍生物，我们要了解抗氧化剂的机理，它们怎样阻止氧化。抗氧化剂的抗氧化机理。
从RH代替脂肪或者脂肪酸
第二步：脂肪RH受热或光金属
第四步 R*+ R*→R-R R*+ RO2*→RO2R
抗氧剂的机制（以AH代表抗氧剂）
抗氧化剂的作用机制是遇到游离基后将游离基破坏，也就是说反映关键是把R*，RO2*作用掉，
A*+ A*→A－A
抗氧化剂--阻止，延迟脂肪自动氧化作用的物质称为抗氧化剂。
增效机剂为抗氧化所加的１/４---１/２即０.０１％
一. BHA测定（比色法）
2.操作方法
BHA标液10μg/ml 0. 0.1 0.3 0.5 0.7 0.9
0.01%2，6---二氯醌氯亚胺 2 2 2 2 2 2
静止15分钟
(2)样品分析
(3)计算 BHA(μg/kg)=V*V1*C/W*V2*V3
V1------------将提取液定容(ml)
W--------样品的重量（g）
V3-----------测定时所用提取液的总体积
C-------相当于BHA的标准量(mg)
注意事项：
例：腌鱼肉2克定容50 ml取出25ml提取BHA定容50ml,测定时取2ml, 取溶液（相当于5微克）代入上式计算
二 PG（没食子酸丙酯）
1. 比色法原理：
2. 操作步骤
取10ml比色管 1 2 3 4 5 6
无水乙醇(ml) 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0
避光出加显色剂 ————1ml ←————
b.样品的处理：称样5g→于烧瓶中→加石油醚50ml→振动30分钟→取上清夜25 ml→于分液漏斗→用40 ml水提取三次→提取液合并于50 ml容量瓶→加水至刻度供测定
d.计算：PG(mg/kg)=V1/W *V3/V2 *C/V4 *1000/1000
V1---样品稀释总体积（ml）
V3---提取后定容(ml)
三 BHT的测定
1.比色法原理
3. 标准曲线的绘制
3.样品处理
4. 测定
2ml→摇匀1分钟→放10分钟→加10ml氯仿→振摇1分钟→分层后→将氯仿液放入黑纸包扎的10ml
5. 计算
W----样品重量(g)
V1------测定时所用的提取液体积（ml）
6. 注意事项：
（2）蒸馏结束后，用热的甲醇淋洗弯管以及冷凝管必须少量多次，以免冲洗不干净，影响结果偏低。
（4）氯仿萃取后，放于暗处1小时，如果暴露于光线中会很快褪色。
四 BHA和BHT混合使用时分离与测定方法，分别显色比色法
用石油醚提取食品中的BHA和BHT。通过硅胶柱使BHA和BHT分离，BHA与2,6---二氯醌氯亚胺-
2..试剂
⑵硼砂缓冲溶液：取硼砂0.6g氯化钾0.7g, NaOH 0.26g 加无水乙醇至500ml，过滤即可使用。
⑷02.%FeCL3溶液：24 小时后重新配置。
⑹石油醚 30-60℃
⑻BHA溶液 称BHA 0.050g→加少量无水乙醇溶解后→转移100ml棕色容量瓶用无水乙醇定容→避光保存→此液为0.5mg/ml临用时取1ml于50ml容量瓶→加无水乙醇定容→为10微克/毫升的BHA
3.方法（整个过程要避免光照进行）
取磨碎样10g→于带塞三角瓶→加石油醚50ml→振摇20分钟→静止后取上层液25ml→通过硅胶柱用石油醚淋洗→收集150ml淋洗液→作为BHT检验液→取出5ml 于蒸发皿中自然挥干→用30%乙醇6ml洗涤滤纸→滤液于洗液合并于比色管→供BHT测定。 无水乙醇淋洗以石油醚淋洗后的硅胶柱，至淋洗液为100ml，供BHT测定。
a)BHT 的测定：
取6个比色管编号 1 2 3 4 5 6
30%乙醇液 ———→1ml←—————————
暗室中加2，2-FeCl2 ———→1ml←———————
样品的测定：取上面BHT测定液20ml→于比色管→加30%乙醇至8ml→加0.2% 2，2---联吡啶1ml→以下按标准曲线绘制
标准曲线的绘制，取6个比色管编号，1 2 3 4 5 6
加无水乙醇 ———→稀释总体积8ml←—
硼砂缓冲溶液 ———→2ml←—————
样品的测定：取BHA测定液4ml→于比色管→用无水乙醇稀释至8ml→以下同标准曲线的绘制
C-----测定用样液中BHA或BHT的含量(μg)
V1 ---BHA或BHT分离时的体积（ml）
V3----BHA或BHT分离后的测定用量 （ml）
1000---将μg换算成 mg
5.注意事项：
析，避免结果偏低。
⑶用柱层分离含油脂多的食品，会受到温度的影响，室温度低，流速缓慢，使分离效果受一些影响，温度在20℃以上进行分离。
目前国内的一些食品厂，近年来，有的将三种或其中的两种，分别用
等BHA、BHT、PG混合使用时BHA与 BHT的总量不得超过0.1g/kg，
1.原理：抗氧化剂与福林---酚试剂结合，生成一种兰色络合物，所生成的颜色深浅与抗氧化剂的浓度成正比，可比色定量。
3.操作方法
2) BHT的提纯方法：根据层析柱内淋洗液基本流尽，再用无水乙醇淋洗，收集100ml淋洗液，供BHA检验液。
准确吸取不同浓度的抗氧化剂标液于10ml比色管中。
标液10μg/ml 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
水 ———→4ml←——————
加水 ———→至总体积6ml←——————
4.计算：根据测的样品的溶液的光密度，从标准曲线上分别查出对应的PG、BHA、BHT含量（微克/毫升）。
C-----从标准曲线上查得的PG,BHA,BHT的浓度（微克/毫升）
V1 ---PG、BHA、BHT分离时的体积（ml）
V3----显色时取样液得体积 （ml）
1000---将μg换算成 mg
5.注意事项：
⑵抗氧化剂本身会被氧化，应尽快分析，避免误差。
