蛋白质定量是生物化学、食品检验和其它生命学科zui常涉及的分析内容,是临床诊断的重要指标,也是许多生物制品、药物、食品质量检测的重要指标。生化实验中,在对生化药品,特别是蛋白质、酶、某些多肽或蛋白质激素的分离纯化时,对蛋白质进行准确可靠的定量分析是非常重要的。
然而蛋白质的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法带来了很大的困难。目前测定蛋白质含量的方法有很多种,不同的方法各有其特点。
附:常用的测定蛋白质含量方法的比较
方 法 | 测定范围 (μg/ml) | 不同种类 蛋白的差异 | zui大吸收 波长(nm) | 特 点 |
凯氏定氮法 | 小 | 标准方法,准确,操作麻烦,费时,灵敏度低,适用于标准的测定 | ||
紫外分光光度法 | 100—1000 | 大 | 280 | 灵敏,快速,不消耗样品,核酸类物质有影响
|
双缩脲法 | 1000—10000 | 小 | 540 | 重复性、线性关系好,灵敏度低,测定范围窄,样品需要量大 |
Folin-酚试剂法 | 20—500 | 大 | 750 | 灵敏,费时较长,干扰物质多 |
考马氏亮蓝G-250 | 50—500 | 大 | 595 | 灵敏度高,稳定,误差较大,颜色会转移 |
BCA | 50—500 | 大 | 562 | 灵敏度高,稳定,干扰因素少,费时较长 |