菌落的裂解和DNA与滤膜的结合实验

本方案介绍如何从携带重组质粒的克隆中释放出 DNA 并将其固定于硝酸纤维滤膜或尼龙膜的方法，这一方法最初由 Grunstein 和 Hogness 使用。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

实验方法原理	本方案介绍如何从携带重组质粒的克隆中释放出 DNA 并将其固定于硝酸纤维滤膜或尼龙膜的方法，这一方法最初由 Grunstein 和 Hogness 使用。
实验材料	带有 E.coli 转化子克隆的滤膜
试剂、试剂盒	变性液中和液SDS (10%m V)2X SSPE
仪器、耗材	玻璃或塑料托盘微波炉滤纸
实验步骤	一、材料 1. 缓冲液和溶剂变性液，中和液，SDS (10%, m/V)，2X SSPE。 2. 专用设备 (1) 处理滤膜用的玻璃或塑料托盘。餐馆用的托盘就很理想，一次可操作直径 9〜10 cm 大小的 25 张滤膜。 (2) 微波炉，真空烤干箱（可达 80℃）或紫外交联装置。 (3) Whatman 3 MM 滤纸。 3. 载体和菌种带有 E.coli 转化子克隆的滤膜。二、方法 1. 将 Whatman 3 MM 滤纸（或相当的滤纸）切成大小和形状适当的 4 张。使之适于 4 个玻璃或塑料托盘的底部，将 4 张 3 MM 滤纸分别浸泡在下列 4 种液体：

2016-03-25