非同位素分析基因活性实验——冻融裂解细胞荧光素酶分析

哺乳动物细胞

PBS

培养皿细胞刮子离心机

1.  用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。

2.  每只培养皿中加1 ml 提取缓冲液，立即用橡胶刮子刮下细抱，移至1.5 ml 微量离心管中。离心15~30 s，弃上清。
3.  在细胞沉淀中加100 μl 提取缓冲液，经3次冻融裂解细胞膜。

4.  将裂解的细胞在4℃以ZD速度离心5 min，移出上清，分析其荧光素酶的活性。