DNA片段探针的应用实验——水溶液中杂交

DNA

杂交液洗膜液

培养箱

1.  除了于65℃在杂交液Ⅰ中温育的条件外，预杂交按甲酰胺法进行。

2.  按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀释。
3.  滤膜在65℃杂交过夜，然后移去杂交液，用低严紧性洗膜液Ⅰ洗膜2次。
4.  用高严紧性洗膜液Ⅰ在65℃迅速洗膜5~8次。
5.  ZH一次洗膜延时到20 min，洗涤后的滤膜的非特异性信号达到仅比背景高几倍的水平。