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λ噬菌体的铺平板培养实验

噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个细菌的感染。DY次感染后合成的子代病毒颗粒吸附和感染邻近细菌,后者依次释放另一代子代病毒颗粒。如果细菌生长在半固体培养基(如含琼脂糖或琼脂)上,这种子代病毒颗粒的扩散是有限的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

实验方法原理噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个细菌的感染。DY次感染后合成的子代病毒颗粒吸附和感染邻近细菌,后者依次释放另一代子代病毒颗粒。如果细菌生长在半固体培养基(如含琼脂糖或琼脂)上,这种子代病毒颗粒的扩散是有限的。
实验材料

λ 噬菌体原种大肠杆菌菌株

试剂、试剂盒

MgSO4SM 和 SM+ 明胶

仪器、耗材

LB 或 NZCYM 琼脂平板Sorvall SS-34 或相当型号圆形滤纸水浴

实验步骤

一、材料
1. 缓冲液和溶液
MgSO4 (10 mmol/L),SM 和 SM+ 明胶
2. 培养基
LB 或 NZCYM(50 ml 分装于 250 ml 的圆锥瓶中)
LB 或 NZCYM 琼脂平板

LB 或 NZCYM 顶层琼脂或琼脂糖(0.7%)
3. 离心机和转子
Sorvall SS-34 或相当型号。
4. 专用设备
圆形滤纸(适用于培养皿)
加热设备或预置于 47℃ 的水浴
5. 载体和菌株
λ 噬菌体原种
大肠杆菌菌株
























2016-03-26
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