非标记蛋白质的磷酸化作用分析实验——化学发光法

蛋白质样品

钒酸钠封阻液NATris·Cl叠氮钠印度墨汁染色液TBS

吸水纸水浴锅

1.  如基本方案步骤1所述，用SDS-聚丙烯醜胺凝胶电泳分离样品，使用含100 μmol/l 钒酸钠的转移液将蛋白质转印至硝酸纤维素滤膜上。 

7.  在比膜稍大的塑料容器内，等体积混合用于ECL检测的鲁米诺试剂和氧化剂。 
8.  将膜（含蛋白质样品的一面朝上）浸入混合试剂，轻摇60 s。
9.  取出膜，沥干多余液体，置于塑料保护膜内，蛋白质朝上。 
10.  在暗室内对X光片曝光15 s~30 min。