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| 实验方法原理 | 根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含McAbγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。 |
|---|---|
| 实验材料 | PBS |
| 试剂、试剂盒 | 缓冲液 |
| 仪器、耗材 | 层析柱GX液相色谱仪 |
| 实验步骤 | 1. 腹水10000 g离心10 min，除去细胞和杂质，在4 ℃条件下逐滴加入饱和硫酸铵溶液，使终浓度为40 ％饱和硫酸铵搅拌20～30 min
4. 洗脱流速1 ml/min 0～1 min：0→5％缓冲液B（20 mM Tris，PH8.5，含2.0 M醋酸钠） 1～20 min（线性梯度洗脱）：5→20％缓冲液B 20～22 min：20→0％缓冲液B
5. 洗脱液用紫外280 nm进行监测
6. 收集蛋白峰，进行含量、纯度和活性测定 展开 |
| 注意事项 | 1. 所用缓冲液和加样粗提物均需0.22 μm滤膜过滤。 |
