丙酮酸脱氢酶（硫辛酰胺）测定实验_氰铁酸为电子受体

酶样品

Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3［Fe（CN）6］

分光光度计

实验所需「试剂」具体见「其他」

0.98 ml 实验混合物

0.02 ml 酶样品

30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降，吸收系数 ε436＝755 l/（mol·cm）。

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试剂：

0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.6

0.1 mol/L MgCl2（MgCl2·6H2O，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L 丙酮酸（丙酮酸钠，Mr＝110.0；110 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L 二磷酸硫胺（ThDP，脱羧辅酶，Mr＝460.8；46.1 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L K3［Fe（CN）6］（Mr＝329.2；330 mg 溶于 10 ml 水中）