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多孔培养板中单层培养细胞生长曲线的绘制实验

实验方法原理以三种不同的细胞浓度在多孔板中培养三组细胞,在达到平台期之前,每天计数一个板中的细胞。
实验步骤

材料
无菌
单层细胞培养:A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm2 培养瓶,晚对数期 1 瓶
0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml
生长液,100 ml, 伴有 26 mmol/L NaHCO3 300 ml
D-PBSA(预洗并用于细胞计数)50 ml
12 孔培养板 10 块
非无菌:
用于装培养板的塑料盒







(b ) 加入 0.5 ml 胰蛋内酶/EDTA 至上述 3 个孔中;
(d ) 加人 0.5 ml 含血清的培养基,在胰蛋白酶/EDTA/培养基中将细胞分离开来,取 0.4 ml 细胞悬液至 19.6 ml 的 D-PBSA 中;







 



2016-04-05
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