分子生物学操作中会涉及一系列仪器,使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项,是使后继实验事半功倍的一个必要准备。
冷冻离心机
使用方法:
2.打开电源开关,按要求装上所需的转头,将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上(离心筒须与样品同时平衡),关闭机盖。
4.按启动键,离心机将执行上述参数进行运作,到预定时间自动关机。
注意事项:
2.开机前应检查转头安装是否牢固,机腔有无异物掉入。
4.挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏,以免腐蚀机腔或造成事故。
6.每次操作完毕应作好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。
附:相对离心力与每分钟转速的换算
两者的互换公式如下:
目前各公司提供的PCR仪操作方法各有不同,按其操作说明进行操作。
一、 准备工作
3.pH值的定位测量法:
(1) 连接好电极线路,将参比电极及活化满24h以上清洁的PH电极移入DY标准缓冲液pH1中(例pH1=4.00),待仪器响应稳定后,调节定位旋钮至仪器显示为“0.00”;
(3) 斜率调节完成后,重新调节定位旋钮,使仪器显示第2种标准液的实际pH值(9.18),至此2点定位结束;
(二)一点定位法(粗略测量法)
(2) 向左将斜率补偿旋钮旋转至头;
(4) 取出电级冲洗吸干水分后移至待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。
1.将功能选择拨至温度档。
四、注意事项
2.仪器通电后或测量过程中出现显示不稳或乱跳现象,应切断电源进行检查,如电压、预热时间及电极系统等是否正常。
4.电极系统从第1种溶液取出移入第2种溶液之前,须用去离子水或双蒸水清洗干净,再用滤纸吸干表面水分,以免影响测定结果的准确性。
6.该类仪器均采用大规模集成电路,输入阻值较高,在对仪器内部进行任何零部件修理焊接时,应使用45W以下有良好地线的烙铁,无接地线烙铁应拨下电源插头焊接。
分光光度计
使用规则
2.初始化约需时10 min,内容包括:①寻找零级光;②建立基线;③ZH当显示器指示××nm时,,表明仪器完成初始化程序,可进入检测状态。
4.以空白管自动调零。
6.检测结束后应及时取出比色杯,并清洗干净放回原处,同时关上仪器电源开关及稳压器电源开关,做好使用情况登记。
1.仪器初次使用或使用较长时间(一般为一年),需检查波长准确度,以确保检测结果的可靠性。
3.每次检测结束后应检查比色池内有否溶液溢出,若有溢出应随时用滤纸吸干,以免引起测量误差或影响仪器使用寿命。
5.仪器室应通常保持洁净干燥,室温以5-35℃为宜,相对温度不得超过85%。有条件者应于室内配备空调机及除湿机,以确保仪器性能稳定。
7.仪器长时间不用时,应定时通电预热,每周1次,每次30min,以保证仪器处于良好使用状态。
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。
1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。
3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。
注意事项
2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
4.在总电流不超过仪器额定电流时(ZD电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。
6.使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。
分析天平:
操作方法
2.事先检查电源电压是否匹配(必要时配置稳压器),按仪器要求通电预热至所需时间。
4.称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,轻按一下去皮键,天平将自动校对零点,然后逐渐加入待称物质,直到所需重量为止。
6.称量结束应及时除去称量瓶(纸),关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。
1.天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥及较恒定的温度,同时应避免光线直接照射到天平上。
3.电子分析天平若长时间不使用,则应定时通电预热,每周一次,每次预热2h,以确保仪器始终处于良好使用状态。
5.挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。
3.电源应用良好接线,以消除外界干扰,使用搅拌器时,务必使搅拌器外壳与仪器接地端相连。
二、pH(酸碱度)测量
2.通过仪器温度档测定标准液及待测样品液温度(要求两种液体温度保持一致,以减少测定误差),并用温度补偿旋钮调节至溶液实际温度值。