细胞免疫化学：免疫酶标技术

1） 直接法

1．标本固定。
3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）YZ内源性过氧化物，室温10～20分钟。
5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。
7．DAB＋H2O2显色5～10分钟，镜下控制染色结果。DAB＋H2O2应用前15分钟配制。

2） 间接法

1．标本固定。
3．1％H2O2（或1％H2O2 甲醇）YZ内源性过氧化物，室温10～20分钟。
5．滴加DY抗体，37℃1小时或4℃过夜。
7．滴加酶标二抗，室温1小时。
9．0.04％DAB＋0.03 ％H2O2显色5～10分钟。

3） PAP法（过氧化物酶抗过氧化物酶抗体复合物法）

1．标定固定后，PBS洗涤。
3．PBS洗涤2×3分钟。
5．滴加一抗，室温1小时或4℃过夜。
7．滴加二抗，室温30分钟。
9．加PAP复合物，室温60分钟。
11． 0.04％DAB＋0.03％ H2O2显色5～10分钟。
13． 苏木精复染，封片观察。

4） 双PAP法

1～10同单PAP法。
12． PBS洗。
14． PBS洗。
16． 苏木精复染核，封片，镜检。

5） ABC法（卵白素－生物素－过氧化物酶复合物法）

1～8同PAP法
10） PBS洗。
12） 充分水洗。