(1)石蜡切片脱蜡入水后,置0.1mol/l PBS pH7.2冲洗5min;冰冻切片直接入PBS冲洗5min。
(3)0.4%Trition X-100 PBS 冲洗15min。
(5)4%多聚甲醛PBS固定5min。
(7)0.25%乙酸酐(0.1mol/l 三乙醇胺配制)10min。
(9)取10μl含相应探针的杂交液滴于标本上,如果是cDNA探针则用前将探针于95℃水浴中保温10min,马上放入冰浴中冷却,然后再用。
(11)4×SSC洗脱盖片,并在同一液中37℃漂洗10~30min。
(13)1×SSC,0.1×SSC,37℃各漂洗10~30min。
(15)3%BSA(0.4%Triton X-100 PBS配)37℃保温30min。
(17)0.05mol/l PBS冲洗4×5min。
(19)TSM2冲洗2×5min。
(21)20mmol/l EDTA,pH8.0终止显色。