技术文章库
细菌 个体微小，普通光学显微镜下不易直接观察，故常用染色技术使细菌细胞着色。包括细菌单染技术、细菌的革兰氏染色技术、细菌的芽孢染色技术、细菌的荚膜染色技术和细菌的鞭毛染色技术
Ⅰ、细菌的单染技术
【实验目的】
2、观察细菌的基本形态
单染色即用单纯的种染料进行染色，多数采用美蓝、结晶紫或石碳酸复红等碱性染料。此法仅能显示细胞的外部形态，而不能辨别其内部结构。染色前必须将细胞固定，其目的是杀死细菌，并使它粘附在载玻片上。此外，还可以增加菌体对染料的亲和力。常用的有加热和化学固定两种方法。无论用哪种方法都应尽量使细菌维持原有的形态，防止细胞膨胀或收缩。
1、菌种 大肠杆菌 （Escherichia coli）
2、染色液 石炭酸品红染色或结晶紫染色液（Stining Solutions）
4、洗瓶装蒸馏水
6、显微镜、香柏油、接种环、酒精灯、擦镜纸、吸水纸、二甲苯
1、涂片：取一片干净无油载玻片，在其ZY滴一滴无菌水，然后用接种环以无菌操作方法取少许培养好的大肠杆菌，放在载玻片的水滴中涂匀，注意菌量不宜过多，否则，不易看清单个菌体。
3、染色：用石炭酸品红或结晶紫染色剂30~60S，然后用洗瓶轻轻冲洗染色剂（注意不要直接冲洗染色部位），直至无多余的染液，晾干或用吸水纸从旁吸干或用微火烘干。
5、镜检：首先在低倍镜下找到物像，然后在涂膜ZY滴一滴香柏油，换成油浸镜观察两个菌种的形态和排列。
【实验结果】
2、用文字描述两菌株的细胞形态。
1、涂片在染色前为什么要先进行固定？固定时应注意什么问题？
3、制片时应注意哪些事项？为什么？
Ⅱ、细菌的革兰氏染色
【实验目的】
【实验原理】
细菌先经碱性染料结晶紫染色，再经碘液媒染（以增加染料与细胞的亲和力）后，用酒精或丙酮脱色，再用复染色剂染色。不被脱色而保持原颜色者为革兰纸阳性菌（G+）；被脱色后又被染上复染剂的颜色者为革兰氏阳性菌（G-）。此法可将细菌分为两大类。
【实验材料、药品及器具】
枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）
2、染液 草酸铵结晶紫液
95%的酒精
3、器皿洗净的载玻片6 片、显微镜、酒精灯、接种环、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、镊子、玻璃缸、瓶装蒸馏水
1、取培养12-24h的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌分别涂片、固定。
3、倾去染液并用洗瓶装水轻轻冲洗。
