人张氏肝细胞, Chang Liver细胞

细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
细胞纯度：95％ 
细胞活力：87％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
人张氏肝细胞, Chang Liver细胞产品说明：
细胞冻存：液氮冻存（基础培养基 10%DMSO 20%FBS）                                             
细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）                                     
人张氏肝细胞, Chang Liver细胞等一系列细胞培养无菌操作步骤
1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。
2.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待30min以上，以排尽臭氧。
3.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。
4.风淋2分钟。
5.0.1%过氧乙酸水泡手，擦干。
6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。
7.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。
8.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。
9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm，避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。
10.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。
11.操作完毕后恢复工作台面。
人张氏肝细胞, Chang Liver细胞细胞冻存
1、取待冻存的细胞用胰酶消化，用培养基将细胞冲洗下来。800r/min离心5min，弃上清收集细胞。如果是悬浮培养的细胞，可直接离心收集细胞。
2、加入适量冻存液(10%甘油+90%培养基，或是10%DMSO+90%培养基)制成细胞悬液。细胞浓度宜大，3*106个/ml左右，并可适量增加小牛血清浓度至20%。
3、细胞悬液装入冻存管中。用胶布封裹，做好标记(注明细胞种类、时间、条件等)。
4、冻存管在4℃下存放30min，转放-20℃1.5h~2h，再转入-70℃4~12h后即可转入液氮内(-196℃)，注意进行登记。
人张氏肝细胞, Chang Liver细胞细胞复苏
1、取一搪瓷杯盛上适量自来水加热至40℃左右。
2、从液氮中取出冻存管立即投入40℃水中迅速解冻。
3、取出冻存管，用75%酒精清洁管口，打开。
4、离心去上清收集细胞，用无血清培养基洗1次，加入3ml新鲜培养基，于小培养瓶中培养。
5、每日观察细胞生长情况，如果死细胞较多，复苏次日应换液。待细胞长满后进行传代培养。
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