细胞名称 大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC 256培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 Walker 256是一株大鼠腹水癌细胞系。该细胞注入大鼠腹腔能快速形成腹水瘤，是研究抗肿瘤药物体内模型的极好材料。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C180
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC 256培养细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC 256培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC 256培养对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
507-70-0右旋龙脑D-borneol20mg
112-80-1油酸Oleic acid20mg
6926-14-3乙酰哈巴苷Acetyl Harpagide20mg
1362-42-1洋艾素Absinthin20mg
463-40-1α-亚麻酸Alpha linolenic acid20mg
463-40-1亚麻酸Linolenic acid20mg
26791-73-1叶黄制菌素Xanthatin20mg
35833-62-63-乙酸南美楝属二醇酯3- South American Melia glycol acetate10mg
94285-22-0乙酰基二氢美味草素 AAcetyl two hydrogen delicious grass A10mg
1617-70-5羽扇烯酮Lupenone20mg
150-86-7叶绿醇Ye Lvchun20mg
482-27-9异虎耳草素Isopimpinellin20mg
1354-84-3一枝蒿甲素Bullatine a20mg
3738-70-3盐酸吐根酚碱Cephaeline hydrochloride20mg
Q1765汉黄芩苷/汉黄芩甙/Wogonoside分析标准品，98%51059-44-0RT，避光20毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，
中文名称： 汉黄芩苷
其他中文名称： 汉黄芩甙
英文名称： Wogonoside
产品规格： 分析标准品，98%
包 装： 20毫克
CAS号：51059-44-0
C22H20O11=460.4
级别：Analytical standard
大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC 256培养含量：≥98.0%(HPLC)
性状：黄色结晶，为黄芩中特有的成分。熔点不明显,230℃变为红棕色，302℃变黑分解。微溶于50%乙醇或甲醇，几乎不溶于水和常见的有机溶剂，水解后生成汉黄芩素
用途：生化研究。
保存：RT，避光
注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
