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Cas9稳定表达的人癌细胞；PANC-1-Cas9-557操作步骤的报价，咨询，称技术服务，欢迎来电咨询选购。
细胞名称 Cas9稳定表达的人癌细胞；PANC-1-Cas9-557操作步骤
形态特性 上皮样；多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418
传代方法 1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人癌细胞；PANC-1-Cas9-557操作步骤操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
Cas9稳定表达的人癌细胞；PANC-1-Cas9-557操作步骤复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过Z易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
Cas9稳定表达的人癌细胞；PANC-1-Cas9-557操作步骤培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2）公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，ZX不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本ZX未进行核实，仅供参考。
4）使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
HPLC≥98%,20mg/支蛇床子素Osthole 484-12-8
HPLC≥96%,20mg/支双去氧基姜黄素Bisdemethoxycurcumin24939-16-0
HPLC≥96%,20mg/支去甲氧基姜黄素Demethoxycurcumin24939-17-1
HPLC≥98%,20mg/支姜黄素Curcumin458-37-7
HPLC≥98%,20mg/支蒿甲醚Hao Jiami71963-77-4
HPLC≥98%,20mg/支槲皮苷;榭黄甙;槲皮甙;栎素;橡皮苷Quercetin;?Xie?Huang?glycoside;?quercitrin;?quercitrin;?rubber?glycoside522-12-3
HPLC≥98%,20mg/支槲皮素Quercetin117-39-5
HPLC≥98%,20mg/支花旗松素;二氢槲皮素;紫杉叶素;黄杉素Taxifolin;?two hydrogen?quercetin;?taxifolin;?taxifolin480-18-2
HPLC≥98%,20mg/支槐果碱Sophocarpine145572-44-7
HPLC≥98%,20mg/支络塞定Network?Saiding100462-37-1
HPLC≥98%,20mg/支络缌Luo?Si85026-55-7
HPLC≥98%,20mg/支络塞维Luo?Seville84954-92-7
HPLC≥98%,20mg/支络塞琳Rosarin84954-93-8
13614-98-72～8℃K0016美满霉素/盐酸米诺环素/二甲胺四环素盐酸/米诺四环素/Minocycline hydrochloride高纯，98%100毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，
1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，
中文名称： 美满霉素
其他中文名称： 盐酸米诺环素；二甲胺四环素盐酸；米诺四环素
英文名称： Minocycline hydrochloride
其他英文名称： [4S-(4alpha,4aalpha,5aalpha,12aalpha)]-4,7-Bis(dimethylamino)-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-octahydro-3,10,12,12a-tetrahydroxy-1,11-dioxonaphthacene-2-carboxamide monohydrochloride
产品规格： 高纯，98%
包装：100毫克/1克
CAS号：13614-98-7
C23H27N3O7 ? HCl= 493.94
级别：High purity grade
含量：≥98.0%
Cas9稳定表达的人癌细胞；PANC-1-Cas9-557操作步骤性状：带盐酸盐，为黄色结晶性粉末，无臭、味苦、遇光可引起变质。溶解于水，略溶于乙醇，易溶于碱金属的氢氧化物或碳酸盐溶液中
用途：生化研究。KJ谱与多西环素相似。作用比四环素强2-4倍，也胜过多西环素、美他环素、土霉素。能克服耐四环素的金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌。
保存：2～8℃
