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Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤

产品信息
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
  公司是Z专业的ATCC细胞供应商，提供 Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤 的报价，咨询，称技术服务，欢迎来电咨询选购。
细胞名称   Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤
形态特性   上皮样
生长特性  贴壁生长　
特征特性   该细胞是采用慢病毒感染的方式使Du145细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418　
传代方法   1:4~1:6传代；每周2~3次。
传代情况  C3
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS　
支原体检测  培养法（-）　
STR   Amelogenin：x,y；CSF1PO：10,11：D12S391：18,20；D13S317：12,14；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：13,13；D21S11：31,32,33；D2S1338：16,16；D3S1358：16,16；D5S818：10,13；D6S1043：11,11；D7S820：7,10,11；D8S1179：13,14；FGA：22,22；Penta E：12,12；TH01：7,7；TPOX：11,11；vWA：17,18；
同工酶  
染色体  
使用权限  A类
 Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤 复苏操作要点： 
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过Z易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
 Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
HPLC≥98%,20mg/支乌药醚内酯Linderane 13476-25-0
HPLC≥98%,20mg/支辛夷脂素Fargesin102036-29-3
HPLC≥98%,10mg/支原苏木素B; 原巴西苏木素Protosappanin?B;?original Brazil?hematoxylin102036-29-3
HPLC≥98%,20mg/支蔓荆子黄素；紫花牡荆素Vitex trifolia?Huang Su;?Casticin479-91-4
HPLC≥98%,20mg/支20(R)原人参三醇20?(R)?three?alcohol?raw ginseng
HPLC≥98%，20mg/支雪胆素甲Hemslecin?a60137-06-6
HPLC≥98%；20mg/支雪胆素甲Hemslecin?a60137-06-6
HPLC≥98%,20mg/支（R型）原人参三醇(type R)?raw?ginseng three?alcohol
HPLC≥98%,20mg/支（R型）人参皂苷Rg3GINSENOSIGinsenoside Rg3GINSENOSI?(R?type)
HPLC≥98%,20mg/支牡荆素; 5, 7, 4＇-三羟基黄酮-Vitexin;?5,?7,?4＇- three?-?hydroxy?flavone3681-93-4
HPLC≥98%,20mg/支牡荆素鼠李糖苷Vitexin?rhamnoside64820-99-1
HPLC≥98%,10mg/支升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷-3-O- beta?-D- pyran?cimigenol?xyloside
HPLC≥98%,10mg/支仙鹤草酚BAgrimophol?B55576-66-4
HPLC≥98%,20mg/支马钱苷酸; 马钱酸; 落干酸Loganin?acid;?loganin?acid;?loganic acid22255-40-9
H0034N-三（羟甲基）甲基-2-氨基乙磺酸钠盐/TES sodium salt，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，70331-82-7高纯，99%25克RT
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，100克
 
中文名称： N-三（羟甲基）甲基-2-氨基乙磺酸钠盐 
其他中文名称： 2-[(三(羟甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸钠
英文名称： TES sodium salt 
其他英文名称： N-(Tris(hydroxymethyl)methyl)-2-aminoethanesulfonic acid sodium salt 
产品规格： 高纯，99% 
包装：25克/100克/500克
CAS号：70331-82-7
C6H14NNaO6S=251.23
级别：High purity grade
含量：≥99.0%
氯化物：≤0.01%
 Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤硫酸盐：0.01%
性状：粉末。useful pH range：6.8～8.2；pKa (25 °C) 7.5。溶于水。熔点 220℃。紫外线吸光度A(5％/1cm，250nm，水中)＜0.05。
用途：生化研究。生物缓冲剂，不能用于Folin 蛋白检测
保存：RT
 Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2）公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，ZX不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本ZX未进行核实，仅供参考。
4）使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。

信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海谷研实业有限公司），内容包括 （Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；DU145-Cas9-540操作步骤）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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