细胞名称 人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH操作步骤
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是由Biedler JL建立的两株神经组织来源的细胞中的一株（另一株是SK-N-MC）。与SK-N-MC不同，该细胞倍增时间更长，表达更高水平的多巴胺-β-羟化酶；常作为细胞介导的细胞毒性分析的靶细胞。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3~1:8传代；每周换液1~2次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：8，13；D18S51：13，16；D19S433：13，14；D21S11：31，31.2；D2S1338：17，19；D3S1358：15，16；D5S818：12；D7S820：7，10；D8S1179：15；FGA：23.2，24；TH01：7，10；TPOX：8，11；vWA：14，18；
同工酶
染色体 44~48
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过Z易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH操作步骤 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
20mg/支五味子甲素Schisandrin a
20mg/支鸢尾苷Tectoridin
HPLC≥98%，20mg/支鸢尾黄素Tectorigenin
HPLC≥99%；20mg/支胡椒碱Piperine
HPLC≥98%，20mg/支辣椒碱Capsaicin
HPLC≥98%；20mg/支β-谷甾醇Beta sitosterol
HPLC≥98%，20mg/支Aconitine
20mg/支羟基积雪草酸Madecassic acid
HPLC≥98%；20mg/支积雪草苷Asiaticoside
HPLC≥98%，20mg/支羟基积雪草苷Madecassoside
20mg/支D-(+)-木糖D-?(+)?- xylose
20mg/支异鼠李素Isorhamnetin
HPLC≥98%；20mg/支盐酸川芎嗪Ligustrazine hydrochloride
20mg/支川芎嗪Ligustrazine
D0043-150次/300ul/支，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，DNA Marker Ⅱ片段：100、300、500、700、900、1000、1200bp保存：-20℃
中文名称： DNA Marker Ⅱ
产品规格： 100～1500
包装： 50次/300ul/支
级别：BR
规格：50次/300ul/支
分子量范围：100～1500
参考片段：100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500bp
产品特点：适用于判断PCR片段的大小
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH操作步骤使用方法：
1. 取5ul本品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中（每1mm点样孔宽度加1ul，如果加样孔较宽，可适当增加上样量）进行电泳
2. 建议凝胶浓度为2-3%琼脂糖凝胶，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-40分钟
3. 通过EB染色，在紫外灯下观察电泳条带
本品可直接使用，不需要加热。及时更换电泳缓冲液并使用新配制的凝胶，以免影响电泳结果
效果：其中500bp条带约为100ng，其余条带浓度大约50 ng
性状：液体。本品由11条带状双链DNA条带组成，为即用型产品，含有1*loading buffer，可根据实验需要，直接取5ul电泳，使用方便，电泳图像清晰。
用途：生化研究。适用于琼脂糖凝胶电泳中D
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH操作步骤培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2）公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，ZX不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本ZX未进行核实，仅供参考。
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