细胞名称 人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)操作步骤
形态特性 淋巴母细胞样;圆形
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞来源于母系Ramos;EBV阴性;表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23);每个细胞表面大约有1500个IL-4的结合位点;分泌IgM(lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代;3~5天1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:13,14;D16S539:10,13;D18S51:15;D6S1043:13,15;D21S11:30;D2S1338:20,23;D3S1358:14,15;D5S818:7,12;D7S820:11;D8S1179:13,16;FGA:20,24;Penta E:21;vWA:15,16;
同工酶
染色体
使用权限 A类
人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)操作步骤 复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过Z易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)操作步骤 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
20mg/支原儿茶酸Protocatechuic?acid
20mg/支原儿茶醛Protocatechuic aldehyde
HPLC≥98%;20mg/支D-四氢药根碱D- four?hydrogen?jatrorrhizine
HPLC≥98%;20mg/支原碱Protopine
HPLC≥90%;10mg/支去芹菜糖桔梗皂苷DTo?apiose?platycodin?D
HPLC≥98%;20mg/支滇Yunaconitine
HPLC≥98%,20mg/支印Printing?of Aconitine
20mg/支次Hypaconitine
HPLC≥98%;20mg/支新New Aconitine
HPLC≥98%;10mg/支碘化木兰花碱Magnoflorine?iodide
10mg/支盐酸黄柏碱Huang Baijian hydrochloride
HPLC≥98%;10mg/支绞股蓝皂苷XLIXGynostemma pentaphylla?saponin XLIX
20mg/支棕榈酸Palmitic acid
D00151克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,牛血红蛋白/血红蛋白(牛血)/血红朊/血球素/血球质/血色蛋白/血色素/Hemoglobin from bovine blood/HbBR9008-02-02~8℃
10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,
100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,
中文名称: 牛血红蛋白
其他中文名称: 血红蛋白(牛血);血红朊;血球素;血球质;血色蛋白;血色素
英文名称: Hb
其他英文名称: Hemoglobin from bovine blood
产品规格: BR
包装: 1克/10克/100克
CAS号:9008-02-0
分子量:~64500
级别:BR
含量(以N计):≥15.0%
干燥失重:≤10.0%
灼烧残渣:≤2.0%
水溶解试验:合格
紫外吸收度(406nm;0.125g/L;1cm):≥0.88
人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)操作步骤性状:红褐色粉末,是脊椎动物红血细胞的一种含铁的复合变构蛋白,由血红素和珠蛋白结合而成,珠蛋白约占96%,血红素占4%。含有四条多肽链,每个多肽链含有一个血红素基团,血红素中铁为二价,与氧结合时,其化学价不变,形成氧合血红蛋白。呈鲜红色,与氧解离后带有淡蓝色
用途:生化研究。可破细胞壁。
保存:2~8℃
人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)操作步骤培养温馨提示:
1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2)公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,ZX不保证其准确性。
3)从文献等处引用的信息本ZX未进行核实,仅供参考。
4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。