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人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤

产品信息
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
  公司是Z专业的ATCC细胞供应商,提供人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤的报价,咨询,称技术服务,欢迎来电咨询选购。
细胞名称 人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤
形态特性   淋巴母细胞样;圆形 
生长特性  悬浮生长 
特征特性   MOLT-4与MOLT-3来源于一名19岁的男性急性淋巴细胞性白血病的复发患者,该患者前期接受过多种药物联合化疗。MOLT-4细胞系为T淋巴细胞起源,p53基因的第248位密码子有一个G→A突变,不表达p53,不表达免疫球蛋白或EB病毒;可产生高水平的末端脱氧核糖转移酶;表达CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS 
传代方法   维持细胞浓度在4×105/ml~2×106/ml;根据细胞浓度每2~3天补液1次。
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS 
支原体检测  培养法(-) 
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12,13;D13S317:12,13;D16S539:11,14;D18S51:13,17;D19S433:14,15;D21S11:28,29,30,31;D2S1338:23,24;D3S1358:14,16;D5S818:12;D7S820:8,10,11;D8S1179:9,14;FGA:22,23,25;TH01:6,8;TPOX:8;vWA:17,18
同工酶  
染色体   84~89
使用权限  A类
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤培养温馨提示:
1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2)公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,ZX不保证其准确性。
3)从文献等处引用的信息本ZX未进行核实,仅供参考。
4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过Z易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
 200mg/支胆固醇Cholesterol
HPLC≥98%:200mg/支L-蛋氨酸(甲硫氨酸)L- methionine?(MET)
200mg/支DL-蛋氨酸(甲硫氨酸)DL- methionine?(MET)
0.5mL/支醋酸辛酯Octyl acetate
20mg/支虫草素Cordycepin
HPLC≥99%;21mg/支补骨脂二氢黄酮甲醚Psoralen two?hydrogen?flavone?ether
HPLC≥98%;20mg/支补骨脂二氢黄酮Psoralen two?hydrogen?flavones
HPLC≥98%;20mg/支补骨脂定Psoralidin
20mg/支表儿茶素Epicatechin
HPLC≥99%;20mg/支表白桦脂酸Confession of?betulin acid
200mg/支L-苯丙氨酸L- phenylalanine
HPLC≥98%,100mg/支D-半乳糖D- galactose
HPLC≥98%,100mg/支β-丙氨酸Beta alanine
200mg/支L-丙氨酸L- alanine
D0011500毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,人血清白蛋白(组份五)/人血白蛋白/血清白蛋白/白蛋白/Albumin Human serum(Fraction V)/HASBR,96-99%70024-90-72~8℃
1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,
5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,
 
中文名称: 人血清白蛋白(组份五) 
其他中文名称: 人血白蛋白;血清白蛋白;白蛋白 
英文名称: HSA 
其他英文名称: Albumin from human serum 
产品规格: BR,96-99% 
包装: 500毫克/1克/5克
CAS号:70024-90-7 
分子量:66478 Da by calculation
级别:BR
含量:96~99% (agarose gel electrophoresis)
水分:≤5.0%
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4操作步骤溶解性:Clear to slightly hazy faint yellow to yellow-brown solution at 200mg plus 4ml of water
性状:片状物
用途:生化研究,Activating agent or stabilizer for certain enzymes
保存:2~8℃,保质期5年

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