1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再 用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )50L特价操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
獐芽菜苷; 獐牙菜苷;Swertia japonica?glucoside;?sweroside;14215-86-2HPLC≥98%,20mg/支
乌金甙; 乌金苷Black?glucoside;?Wujin?glycosideHPLC≥98%,20mg/支
重楼皂苷VII;重楼皂苷VIIParis polyphylla?saponin VII;?Paris polyphylla?saponin VII76296-75-8HPLC≥98%,20mg/支
重楼皂苷VI;重楼皂甙VIParis polyphylla?saponin VI;?Paris Phyllin VI 55916-51-3HPLC≥98%,20mg/支
鼠尾草酚: 鼠尾草苦内脂Carnosol:?Sage?oxymatrine5957-80-2HPLC≥98%,20mg/支
重楼皂苷II;重楼皂甙IIParis polyphylla?saponin II;?Paris Phyllin II76296-72-5HPLC≥98%,20mg/支
重楼皂苷I;重楼皂甙IParis polyphylla?saponin I;?Paris Phyllin I50773-41-6HPLC≥98%,20mg/支
小白菊内酯Parthenolide20554-84-1HPLC≥98%,20mg/支
瑞香素; 祖师麻甲素Daphnetin;?master Ma Jiasu207-632-8HPLC≥98%,20mg/支
葫芦巴碱盐酸盐;盐酸葫芦巴碱Trigonelline?hydrochloride;?trigonelline hydrochloride6138-41-6HPLC≥98%,20mg/支
槐角碱Sophora japonica?base78281-02-4HPLC≥98%,20mg/支
香紫苏醇The fragrant Perilla Alcohol515-03-7HPLC≥98%,20mg/支
羟基红花黄色素AHydroxysafflor yellow A78281-02-4HPLC≥98%,20mg/支