BL21 (DE3)化学感受态细胞厂家
- 型号:SY0014
- 产地:中国大陆
- 供应商:北京百奥莱博科技有限公司
- 供应商报价:570
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名称:BL21 (DE3)化学感受态细胞厂家
产地:国产|进口
编号:SY0014
品Pai:百奥莱博
英文名:BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
本品是在大肠杆菌BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的GX表达宿主,其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。经检测,本品无外源质粒DNA残留,转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。
组份:
BL21 (DE3)化学感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl
注意事项
1)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
2)待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。
4)为确保效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
5)本品应于-80℃保存,请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化。
2)将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
3)42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,静置2-3分钟。
4)向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,37℃水浴锅中静置10分钟。
5)150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
6)2,500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
储存:-80℃。.jpg)
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