人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书
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人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书 ELISA的基本原理有三条:
(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
酶联免疫(ELISA)使用试剂盒检测过程中值得关注的问题
1.仪器质控 为使仪器保持工作状态,应建立维护和校正仪器的标准操作程序(SOP),所要控制的仪器包括移液器(加样枪)、温箱、洗板机和酶标仪。◎移液器: ELISA加样量小(20-200μl),其准确性直接影响实验结果,利用称重法检查:低、中、高三个刻度分别吸取指示量的水,万分之一天平称重后计算吸量是否准确,一般应在±5%以内;◎恒温箱: 经常检查恒温箱温度计所示的温度和水中(或温箱内)实测温度是否一致,允许有±1℃的误差;◎洗板机: 每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定,一般不超过2μl;人工扣板时,垫纸不湿;定期检查管孔是否堵塞;◎酶标仪:经常维护其光学部分,防止滤光片霉变,定期检测校正,使其保持良好的工作性能。
2. 酶标分析过程中的注意事项 样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。
人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书 下面将ELISA法与免疫荧光(IFA)和放射免疫(RIA)的各自优缺点作一简要的比较(表4),供参考:
表4:三种方法的优缺点比较:
| 方法种类 比较指标 | ELISA | RIA | IFA |
| 敏感性 | 高 | 高 | 较低 |
| 特异性 | 取决于抗原制备 | 同左 | 较高 |
| 重演性 | 尚满意 | 尚满意 | 尚满意 |
| 结果判断 | 客观 | 客观 | 有主观因素 |
| 抗原制备 | 较容易或复杂 | 同左 | 较容易 |
| 结合物制备 | 正在标准化 | 已标准化 | 已标准化 |
| 在野外条件下用于大量人群标本的普查 | 可以 | 困难 | 尚可以 |
| 分析自动化 | 可以 | 可以 | 困难 |
| 主要设备 | 酶标比色计 | 粒子计数器 | 荧光显微镜 |
| 试验成本 | 低 | 高 | 较高 |
| 试剂半衰期 | 长 | 短 | 长 |
| 对人的危害性 | 无或很少 | 有 | 无或很少 |
| 主要检测对象 | 抗体或抗原 | 抗原 | 抗原或抗体 |
| 应用范围 | 小的诊断实验室 | 大的ZX实验室 | 小的诊断试验室 |
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