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高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销

产品信息
高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

 
ELISA试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。


高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销实验步骤
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：在各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：在各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：在每孔中加入1滴终止液混匀
6、结果判定：在450mm处测光值，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

 
ELISA试剂盒的标准曲线拟合
一般情况按照说明书推荐方法拟合标准曲线。标准曲线可以由酶标仪附带软件自动生成，也可手动制作。标准曲线呈“S”形曲线，两端趋于水平，中间趋于线性，中间部分为较佳的检测范围。当标准品的量超过与包被抗体结合的量，此时标准品已饱和，再增加标准品的量，其OD值不再变化，故当标准品达到一定浓度后，曲线就趋于水平。一般厂商给出的浓度范围落在中间线性范围，根据标准曲线，可以测出样本的浓度。按照科学分析方法，如果存在“奇异点”或者“污点”，直接采用线性分析不是很好，要对拟合标准曲线的几个点进行取舍，同时也可改用双对数直线拟合或者四因素曲线拟合。
 

高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销注意事项
a. 在收集标本前请制订一个完整的计划，必须清楚明白要检测的成份是否足够稳定。
b.建议新鲜标本收集后尽早检测。1-3天左右检测的样本可储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期性收集标本，请将标本及时分装后放在-20℃或- 70℃条件下保存，避免反复冻融。
严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准
浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。一次加样时间Z好控制在5分钟内.
请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。
在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
底物请避光保存。
不同批号组分不得混用。


试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%


检测范围和保存条件及有效期              
1ng/L -30ng/L
1.试剂盒保存：2-8℃
2．有效期：6个月
 
 
计算
  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。


高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销问题与答案
问：Elisa方法的不测人血小板第四因子里IgG抗体的滴度吗？
答：Elisa不测滴度的，荧光法可以测
问：酶标板不平，影响结果吗。
答：不影响结果的。
问：样本稀释液可以用来直接稀释血清吗？
答：可以的，直接加40ul就可以了
 问：那我们算出来的ACH含量为什么出现负值？
答：说明个别样本的浓度很低，当浓度接近第6个点的时候 直线方程就有可能计算出负值
问：一个孔需要多少量的血清？
答：一个孔上样量10-50微升。


关于我们
南京金益柏生物科技有限公司拥有技术团队，为您提供优质的，同时进行免费代测服务，保证样本真实上机检测，提供实时上机图片、原始数值（OD值）图片，全方位解决高灵敏大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA试剂盒现货促销实验过程中（实验前期——实验中期——数据整理）技术问题。
 

 
 
 
 

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