高灵敏度人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书_详细资料

产品信息

高灵敏度人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书ELISA的标准曲线拟合
一般情况按照说明书推荐方法拟合标准曲线。标准曲线可以由酶标仪附带软件自动生成，也可手动制作。标准曲线呈“S”形曲线，两端趋于水平，中间趋于线性，中间部分为较佳的检测范围。当标准品的量超过与包被抗体结合的量，此时标准品已饱和，再增加标准品的量

高灵敏度人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书操作技术流程
a.用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
b.加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
c.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
d.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、e.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。

保存条件及有效期
1.保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月

高灵敏度人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内，3.如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。不同批号组分不得混用。

高灵敏度人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书ELISA的标准曲线拟合

一般情况按照说明书推荐方法拟合标准曲线。标准曲线可以由酶标仪附带软件自动生成，也可手动制作。标准曲线呈“S”形曲线，两端趋于水平，中间趋于线性，中间部分为较佳的检测范围。当标准品的量超过与包被抗体结合的量，此时标准品已饱和，再增加标准品的量，其OD值不再变化，故当标准品达到一定浓度后，曲线就趋于水平。一般厂商给出的浓度范围落在中间线性范围，根据标准曲线，可以测出样本的浓度。按照科学分析方法，如果存在“奇异点”或者“污点”，直接采用线性分析不是很好，要对拟合标准曲线的几个点进行取舍，同时也可改用双对数直线拟合或者四因素曲线拟合。

性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%

高灵敏度人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书样本处理

在收集标本前需有一个完整的计划，需要清楚要检测的成份是否足够稳定。ELISA检测提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。

ELISA试剂盒常见问题
Q：Elisa代测结果表格每组表达什么？
A：S1-S5 代表标准品个表格是吸光度第二个是对应表第三个是数据处理（是根据标准品那个线性关系出来的）第四个表结果是都乘以5得到的问：为什么×5？答：因为我们做的时候是10ul样本+40ul样本稀释液做的
Q：那个U是代表什么？
A：U是调零的，什么都不加。
Q：为什么检测结果结果单位表达不一样？
A：ng/ml是质量单位， pmol/L是浓度单位，一般是没法换算的，在采购试剂盒时请用户说明单位
1ng/ml = 1000pg/ml

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