人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒说明书

人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa试剂盒说明书  人神经生长因子受体(NGFR)ELISA试剂盒厂家

人ELISA试剂盒产品简介：

检测范围：来电咨询

样品形式：血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询）

保存与运输：短期4℃/长期-20℃保存

应用范围：科研用检测试剂

人ELISA试剂盒说明：

1．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

人ELISA试剂盒试验原理:

ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

人ELISA试剂盒操作步骤：

1，试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2，实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3，不用的其它试剂应包装好或盖好。

4，使用一次性的吸头以免交叉污染，避免使用带金属部分的加样器。

5，使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6，洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

8，严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。

本公司专业供应各Elisa试剂盒，其质量被全国各大院校科研机构认可，并指定为Elisa试剂盒长期供应商，作为战略合作伙伴。欢迎来电咨询订购！

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人ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材:

1.标准规格酶标仪

2.高速离心机

3.电热恒温培养箱

4.干净的试管和Eppendof管

5.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，Z好用多通道移液器

6.蒸馏水，容量瓶等

人ELISA试剂盒实验原理:

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

人ELISA试剂盒注意事项：

1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

试剂盒组成及试剂配制:

1.酶联板(Assay plate )：一块(96孔)。

2.标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。

3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDiluent)：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)

7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)

8.底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

酶联免疫的洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA?是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中，洗涤是Z主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。

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人ELISA试剂盒标本的采集及保存:

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 xg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本的稀释原则：

首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。

标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。

如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

生物素标记抗体的稀释原则：

临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：

临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

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人ELISA试剂盒产品优势：

上海酶远ELISA试剂盒免费代测、送货上门

运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。

    您于我公司购买产品后有任何疑问，都可以打电话给我公司业务员，我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间，我们还提供免费代实验，只要你把样品邮寄给我们，我们会在5-7个工作日内完成，并且保证结果。如果您对我们的ELISA试剂盒感兴趣的话，您可通过QQ在线咨询、邮箱咨询、网站留言、电话拨打的方式与我们取得联系，我们将竭诚为您服务，祝您工作愉快！

人ELISA试剂盒订购说明：

1. 明确检测何种蛋白；

2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好；

3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒；

4. 咨询上海酶远使用的抗体类型；

5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。

常见问题：

1. 问－－客户用48T试剂盒，大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条，但是他想做两次，可封板膜只有一张，那如果用完了怎么办？可以用什么别的东西取代吗？

答－－可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。

2. 问－－实验过程中温育是放在哪温育呢？

答－－可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行，只要恒定温度为37度。