T4 RNA连接酶 1（T4 RNA Ligase 1)

 数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 1000U
催化 3＇→5＇ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5＇ -磷酸末端和 3＇-羟基末端连接。伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi 作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。具体有下列特点：1. 连接单链 RNA 和 DNA2. 用 5＇ -[32P] pCp 进行 RNA 3＇ 末端标记3. RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接4. 合成单链寡脱氧核苷酸5. 蛋白质中掺入非天然氨基酸6. 无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶污染。

1．感受态的制备

（1）T4 RNA连接酶 1（T4 RNA LIGASE 1)接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）T4 RNA连接酶 1（T4 RNA LIGASE 1)加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

T4 RNA连接酶 1（T4 RNA LIGASE 1)载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，T4 RNA连接酶 1（T4 RNA LIGASE 1)在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

 ZS7051M Tris-HCl,pH8.8100mlZOMANBIO

ZS7061M Tris-HCl,pH9.5100mlZOMANBIO

ZS7070.5M EDTA pH8.0100mlZOMANBIO

ZS7085M  氯化钠溶液100mlZOMANBIO

北京庄盟国际生物基因科技有限公司                                                                                                                            Genacea Inc-ZG区代理

产品货号GenPrep微量DNA提取产品名称类别GenPrep                 产品中文名规格   (盒/次)

GP10001-1GenPrep? Blood DNA Extraction全血 血清 血浆100

GP10001-2GenPrep? Blood DNA Extraction 全血 血清 血浆50

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