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现货 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,人ANG-1检测试剂盒 价格

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现货 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,人ANG-1检测试剂盒 价格
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产品中文名称:人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒
产品英文名称:Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit

规格:48T、96T

用途:科研试剂

 现货 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,人ANG-1检测试剂盒 价格 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

 现货 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,人ANG-1检测试剂盒 价格  组成:

名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 8孔×12条 12孔×4条
标准品(120 pg/mL) 0.6mL 0.6mL 按说明书进行稀释
标准品稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
样本稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
检测抗体-HRP 10mL 5mL
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL
底物B 6mL 3mL
终止液 6mL 3mL
封板膜 2张 2张
说明书 1份 1份
自封袋 1个 1个

注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:120、60、30、15、7.5、3.12pg/mL.

 现货 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,人ANG-1检测试剂盒 价格  收集样品、处理及保存方法:
1.  血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,  1000*g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
2.  血浆:EDTA,柠檬酸盐,肝素血浆可用于检测。1000*g离心30分钟去除颗粒。
3.  细胞上清液:1000*g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000*g离心10分钟,取上清液。
5.  保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70°C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血活高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37°C 或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 现货 人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,人ANG-1检测试剂盒 价格操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 

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