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下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。
1．样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。
2．试剂盒平衡 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温（约25℃），一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
3．样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。

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大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。

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小鼠卵清蛋白特异性IgE ELISA试剂盒北京,小鼠OVA sIgE）ELISA Kit 

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DX0292 小鼠C型钠尿肽 ELISA试剂盒北京,小鼠CNP）ELISA Kit Mouse C-type

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DX0299 小鼠丙酮酸脱氢酶E1 ELISA试剂盒北京,小鼠PDH E1） ELISA Kit 

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DX0300 小鼠糖原合成酶激酶 ELISA试剂盒北京,小鼠GSK）ELISA Kit Mouse

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DX0301 小鼠高敏三碘甲状腺原氨酸 ELISA试剂盒北京,小鼠u-T3）ELISA Kit 

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DX0302 小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠Bid）ELISA Kit 

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DX0303 小鼠胱天蛋白酶9 ELISA试剂盒北京,小鼠Casp-9）ELISA Kit Mouse

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DX0304 小鼠阿立新A ELISA试剂盒北京,小鼠Orexin A）ELISA Kit Mouse

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DX0305 小鼠胱天蛋白酶3 ELISA试剂盒北京,小鼠Casp-3）ELISA Kit Mouse

Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒

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DX0306 小鼠B细胞淋巴瘤因子2 ELISA试剂盒北京,小鼠Bcl-2）ELISA Kit 

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DX0307 小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子 ELISA试剂盒北京,小鼠TSGF）

ELISA Kit Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied

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DX0308 小鼠羟脯氨酸 ELISA试剂盒北京,小鼠Hyp）ELISA Kit Mouse

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DX0309 小鼠骨保护素配体 ELISA试剂盒北京,小鼠OPGL）ELISA Kit Mouse

Osteoprotegerin Ligand,OPGL ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测

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DX0310 小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠LF/LTF）ELISA

Kit Mouse Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit 进口原装elisa说明书，

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DX0311 小鼠抗肌内膜抗体IgA ELISA试剂盒北京,小鼠EMA IgA）ELISA Kit 

Mouse anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit 进口原装elisa

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DX0312 小鼠铁蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠FE）ELISA Kit Mouse

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DX0313 小鼠碳酸酐酶2 ELISA试剂盒北京,小鼠CA-2）ELISA Kit Mouse

carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA Kit  进口原装elisa说明书，elisa测

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DX0314 小鼠色素上皮衍生因子 ELISA试剂盒北京,小鼠PEDF）ELISA Kit Mouse

pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit 进口原装elisa

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DX0315 小鼠解整合素样金属蛋白酶8 ELISA试剂盒北京,小鼠ADAM8）ELISA Kit 

Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 进口

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DX0316 小鼠抗胰蛋白酶 ELISA试剂盒北京,小鼠AT）ELISA Kit Mouse Anti-

trypsin,AT ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒代理免费

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DX0317 小鼠胰岛细胞抗体 ELISA试剂盒北京,小鼠ICA）ELISA Kit Mouse

islet cell antibody,ICA ELISA Kit  进口原装elisa说明书，elisa测

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DX0318 小鼠肾损伤分子1 ELISA试剂盒北京,小鼠Kim-1 ELISA Kit 代测 

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DX0319 小鼠抗单核细胞抗体 ELISA试剂盒北京,小鼠AMA）ELISA Kit Mouse

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DX0320 小鼠氧化低密度脂蛋白抗体 ELISA试剂盒北京,小鼠OLAb）ELISA Kit 

Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit  进口

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DX0321 小鼠抗平滑肌抗体 ELISA试剂盒北京,小鼠ASMA）ELISA Kit Mouse

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DX0322 小鼠胚胎干细胞系MESPU30 ELISA试剂盒北京,小鼠M30）ELISA Kit 

Mouse Embryonic Stem MESPU30,M30 ELISA Kit 进口原装elisa说明书，

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DX0323 小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽 ELISA试剂盒北京,小鼠NF-κB p65）

ELISA Kit Mouse nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit 

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DX0324 小鼠纤溶YZ因子/凝血酶激活的纤溶YZ物 ELISA试剂盒北京,小鼠

TAFI）ELISA Kit Mouse Thrombin activatable fibrinolysis

inhibitor,TAFI ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒

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DX0325 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa ELISA试剂盒北京,小鼠GP-ⅡbⅢ

a/CD41+CD61）ELISA Kit Mouse platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢ

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DX0326 小鼠游离脂肪酸 ELISA试剂盒北京,小鼠FFA）ELISA Kit Mouse

free fatty acids,FFA ELISA Kit  进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒

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DX0327 小鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1 ELISA试剂盒北京,小鼠TSP-

1）ELISA Kit Mouse thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 进口原装elisa

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DX0328 小鼠骨粘连蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠ON）ELISA Kit Mouse

osteonectin,ON ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒

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DX0329 小鼠叶酸 ELISA试剂盒北京,小鼠FA）ELISA Kit Mouse Folic

acid,FA ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒代理免费

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DX0330 小鼠组蛋白H2b ELISA试剂盒北京,小鼠histon-H2b）ELISA Kit Mouse

histon-H2b ELISA Kit 进口原装elisa说明书，elisa测定试剂盒代理免费

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DX0331 小鼠糖皮质类固醇受体 ELISA试剂盒北京,小鼠GR）ELISA Kit Mouse

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DX0332 小鼠黄体生成素释放激素 ELISA试剂盒北京,小鼠LHRH）ELISA Kit 

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DX0333 小鼠脑红蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠NGB）ELISA Kit Mouse

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DX0334 小鼠8异前列腺素 ELISA试剂盒北京,小鼠8-iso-PG）ELISA Kit Mouse

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