登革热IgG/IgM抗体检测试剂盒
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登革热IgG/IgM抗体检测试剂盒
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登革热IgG/IgM抗体检测试剂盒
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以下是我司出售的部分登革热产品
登革热NS1抗原快速检测卡 |
登革热NS1 ELISA检测试剂盒 |
登革热IgG/IgM快速检测试剂盒 |
登革热IgG快速检测试剂盒 |
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登革热IgG ELISA检测试剂盒 |
登革热IgM ELISA检测试剂盒 |
登革热IgM捕获法ELISA检测试剂盒 |
登革热IgG间接法ELISA检测试剂盒 |
登革热IgG/IgM抗体检测试剂盒
通过将游离核苷酸加RNA中,或者喺溴化乙锭染色嘅凝胶上运行0.5μL RNA,喺260 nm处寻找吸光度嘅结果嚟评估结果。
三。退火RNAZ大化对产量
1)结合互补RNA嘅转录反应
喺75℃下哺育五分钟,然后将混合物摆喺张凳度冷却至室温。RNA喺冷却时会退火,形成dsRNA。唔好将反应摆喺雪上冷却。
2)喺75℃下哺育五分钟,然后冷却至室温,喺琼脂糖凝胶上检测dsRNA嘅一/第四百。
喺1%琼脂糖凝胶(非变性)上运行DSRNA嘅一/第四百,以检查双体形成嘅哂成性同埋效率。
廿μl dsRNA溶液嘅一/第四百为1:100稀释嘅5μl。
稀释TE(10毫米TrI,一毫米EDTA)或者凝胶加载缓冲液中嘅凝胶样品。
4。核酸酵素消化抹得甩DNA同SSRNA
1)喺雪上组装RNase消化反应
所示嘅量为二十μL转录反应;如果转录反应较大,就就放开。
表1
擒
成分
廿μl
dsRNA
21μl
无核酸酵素水
5μl
10X消化缓冲液
2μl
DNase一世
2μl
核糖核酸酶
2)喺37°C.哺育1钟
SSRNA将喺15分钟后消化,但允许哺育进行1钟以完全消化DNA模板。唔好继续培养2钟以上。
5。dsRNA嘅纯化
1)组装dsRNA结合混合物
按照下述步骤,透过加10X结合缓冲液、水同乙醇将dsRNA结合混合物组装到dsRNA上。
表2
数量
成分
五十μl
DSRNA(嚟自以上步骤D.2)
五十μl
10X结合缓冲液
百五μl
无核酸酵素水
250μl
乙醇
2)将粘结剂捞到隔筒上,并将其拉通。
将个五μl嘅dsRNA结合混合物移到隔筒中嘅过滤器上,并通过离心或者真空歧管将其吸入。
無料のヌクレオチドのrnaに組み込まれている260 nmの吸光度の減少を探すことによって、結果を評価する、または臭化エチジウムで染色したゲル上のrnaの. 5μlの試料を実行することによって
3。二重の収量をZ大にするrnaアニーリング
1)は、相補的なrnaを含む転写反応混合物
75°cでインキュベート後5分のために残して、ベンチの上に混合物を室温まで冷却する。rna dsrnaを形成しそれを冷却し、アニール。クールに氷の上に反応しないでください。
2)5分のための75°cでインキュベートして、次いで室温チェック1 / 400回目のアガロースゲル上のdsrnaをクール
ランは1 %アガロースゲル上での1 / 400(非変性)の完全性と二重鎖形成の効率を検討した。
20μl dsrna液の1 / 400は、1 : 100希釈の5μlである。
teにおけるゲル試料希釈(10 mmのトリス(1 mm edtaまたはゲルバッファにロードします。
4。dnaと一本鎖rnaを除去するヌクレアーゼ消化
1)氷のrnアーゼ消化反応を組み立てる
示された量を20μlの転写反応のためにあなたの転写反応が大きいならば、アップスケール。
表1
マウント
成分
20μl
dsrna
21μl
ヌクレアーゼ遊離水
5μl
10 x消化バッファ
2μl
dnアーゼi
2μl
rnアーゼ
2)1時間37℃で培養する
1本鎖rna消化し、15分後に、しかし、インキュベーションはdnaテンプレートを完全に消化するのが1時間を続行するのを許します。このインキュベーション2よりも長い時間を続けないでください。
5。dsrnaの精製
1)dsrna結合混合物を組み立てる
10 x結合バッファ、水を加えることによってdsrna結合混合物を集めて、100 %のエタノールdsrnaを下の表による。
表2
量
成分
50μl
dsrna(からステップ2以上)
50μl
10 x結合バッファー
150μl
ヌクレアーゼ遊離水
250μl
100 %のエタノール
2)フィルタカートリッジへの結合の混合物を適用すると、それを通して描く
ピペットは、全体が500μl dsrna結合ミックスフィルタにフィルタ・カートリッジとそれを描くを通して遠心分離や真空管を用いた。