WK20023E 人黏膜地址素细胞黏附分子试剂盒

人黏膜地址素细胞黏附分子试剂盒ELISA常用的几种方法
一、双抗体夹心法测定抗原
将抗原免疫一种动物获得的抗体吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗体复合物;
加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物;
加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);
加底物。底物的降解量＝抗原量。
二、直接法测定抗原
将抗原吸附在载体表面；
加酶标抗体，形成抗原—抗体复合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
三、间接法测定抗体
将抗原吸附于固相载体表面；
加抗体, 形成抗原-抗体复合物；
加酶标抗体；
加底物。 测定底物的降解量＝抗体量。
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人黏膜地址素细胞黏附分子试剂盒实验规则：
       1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
        2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
        3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
        4、实验时，要使底物避光保存。
        5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
        6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
        7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
        8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
       9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
        10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
        11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
        12、底物是光敏感的，要在临用前现配。
        13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
        14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
        15、待检样品要澄清，否则会影响结果。
        16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
        17、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
        18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
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