Human LEP（Leptin） ELISA Kit
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| 品牌 | 自营品牌 | 供货周期 | 现货 |
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Human LEP(Leptin) ELISA Kit人瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组LEP浓度
检测原理Human LEP(Leptin) ELISA Kit人瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒该试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人LEP抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人LEP会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人LEP抗体与结合在包被抗体上的人LEP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，LEP浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中LEP的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 4.5h |
| 反应性 | 人 |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 78.13—5000 pg/mL |
| 灵敏度 | 46.88 pg/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
可检测样本中的人LEP，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
Human LEP(Leptin) ELISA Kit人瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒该试剂盒重复性板内，板间变异系数均<10%。
典型数据由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 5000 | 2.553 2.573 | 2.563 | 2.507 |
| 2500 | 1.724 1.738 | 1.731 | 1.675 |
| 1250 | 1.009 0.971 | 0.99 | 0.934 |
| 625 | 0.481 0.489 | 0.485 | 0.429 |
| 312.5 | 0.262 0.24 | 0.251 | 0.195 |
| 156.25 | 0.177 0.157 | 0.167 | 0.111 |
| 78.13 | 0.106 0.118 | 0.112 | 0.056 |
| 0 | 0.047 0.065 | 0.056 | -- |
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板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) | 262.50 | 443.60 | 2447.30 | 262.30 | 438.80 | 2513.70 |
| Standard deviation | 16.30 | 24.80 | 124.80 | 16.30 | 19.70 | 98.00 |
| C V (%) | 6.21 | 5.59 | 5.10 | 6.21 | 4.49 | 3.90 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=5) | 90-103 | 95 |
| EDTA plasma (n=5) | 94-110 | 101 |
| Cell culture media (n=5) | 90-104 | 96 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 91-105 | 97-111 | 89-101 |
| Average (%) | 97 | 102 | 94 | |
| 1:4 | Range (%) | 94-110 | 81-92 | 94-109 |
| Average (%) | 102 | 86 | 101 | |
| 1:8 | Range (%) | 97-112 | 82-92 | 95-111 |
| Average (%) | 103 | 87 | 102 | |
| 1:16 | Range (%) | 98-113 | 84-95 | 96-108 |
| Average (%) | 106 | 90 | 101 |
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃，可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 4℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 4℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 4℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
 | 1.Add 100 μL of standard or sample to each well. |
 |  2.Remove the liquid. |
 | 3.Add 100 μL Biotinylated Detection Ab. Incubate 1 hour at 37℃.Aspirate and wash 3 times. |
 | 4.Add 100 μL HRP Conjugate. Incubate 30 min at 37℃.Aspirate and wash 5 times. |
 | 5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃. |
 | 6.Add 50 μL of Stop Solution. |
 | 7.Read the OD at 450 nm immediay. Calculation of the results. |
