斑马鱼胚胎细胞系

斑马鱼胚胎细胞系从表观正常的成年雌性可卡犬中建立了细胞株MDCK (ATCC CCL-34)，从中克隆建立了狗上皮样细胞株Super Tube。 当维持高细胞浓度时，Super tube形成大量的小管(据报道，24孔板的每孔铺7x105细胞，３天内就能形成小管)。 要形成小管，细胞需要每天两次换液以提供足够养分。 与原始细胞株相比，Super Tube的c-AMP的检测水平低得多，在forskolin刺激下读出的腺苷环化酶水平也低；它的跨上皮抗性也比Super Dome (ATCC CRL- 2286) 和 MDCK都低。

规格：5×105cells/瓶
培养条件：37℃，5% CO2，PH值7.2~7.4，无菌恒温培养。
细胞数量：1× 106个
细胞传代：1:4~1:6传代；每周换液2~3次
细胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:DMEM（高糖） +10% FBS；37℃，5% CO2
传代方法:建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
细胞冻存：液氮冻存​​​​​

T25瓶细胞处理方法

收到斑马鱼胚胎细胞系后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热完全培养基（含1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

②若细胞密度较大，达到80%以上，将细胞传代培养。

注：

培养瓶里的培养基血清浓度为5%，建议更换成自己配好的新鲜培养基。由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基。（这里是针对原来完全培养基FBS浓度是10%的情况，如果原来FBS浓度是20%，可以增加到25%FBS浓度）   收到细胞后如细胞状态不佳或培养中遇到问题，请当天反馈并提供图片，且保存前三天照片以便分析。7天内反馈，细胞本身问题免费重发如人为原因导致可根据实际情况酌情处理；7天内未接到任何反馈视为合格，不予免费售后。