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Qiagen 217184 人体血浆和血清miRNA提取试剂盒miRNeasy Serum/Plasma Kit (50)

关键词：Qiagen 217184 、人体血浆和血清、miRNA提取试剂盒

产品信息

Qiagen现货miRNeasy Serum/Plasma Kit (50) Qiagen现货miRNeasy Serum/Plasma Kit (50)

产品描述

用于从动物及人体血浆和血清中纯化包括miRNA的无细胞总RNA内参用于标准化，洗脱体积Z小化，高纯度RNA，适合多种下游应用，简单、灵敏的操作流程，自动化实验方案。

miRNeasy Serum/Plasma Kit可从至多200 µl血清或血浆中有效纯化RNA。miRNeasy Kits制备的RNA纯度高，可直接用于敏感的下游应用。miRNeasy操作流程将盐或苯酚污染的可能性降到较低，这些污染可能影响后续分析。

miRNeasy Serum/Plasma Kit整合了基于苯酚/胍的样本裂解方法和基于硅胶膜的总RNA纯化方法。试剂盒中包括的QIAzol Lysis Reagent是苯酚和异硫氰酸胍的单相溶液，便于裂解组织，YZRNases，并去除大部分有机抽提裂解液中的胞内DNA和蛋白。

Procedure

血清和血浆样本溶于QIAzol Lysis Reagent中。加入氯fang后，裂解液离心后分成水相和有机相。RNA位于上层水相，DNA位于中间相，蛋白位于下层有机相或中间相。

提取上层水相后，加入乙醇以提供RNA结合的合适条件，RNA分子大于18个核苷酸。样品再加入RNeasy MinElute离心柱，总RNA结合到膜上，苯酚和其他污染物被有效洗去。高品质RNA在小体积不含RNase水中洗脱。

血清和血浆中主要含有小RNAs，因此无需分开纯化小RNA和大RNA组分。

使用miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control进行标准化

使用miRNeasy Serum/Plasma Kit纯化miRNA时，加入QIAzol Lysis Reagent后，在加入氯fang分相前，向样本中加入miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control。real-time RT-PCR后，合成miRNA的CT值可对样本进行标准化，可作为不同RNA纯化产量和扩增效率的对照。此外，通过与合成miRNA的标准曲线CT值比较，可评估RNA的回收，因为合成miRNA与RNA纯化流程无关。

在QIAcube全自动核酸纯化仪上进行miRNA自动纯化 

在QIAcube全自动核酸纯化仪上可完全自动纯化包括miRNA的总RNA。新型QIAcube全自动核酸纯化仪采用先进技术处理QIAGEN离心柱，将自动化、低通量样品制备无缝整合到实验室工作流程中。使用QIAcube全自动核酸纯化仪的样品制备流程与手工操作相同（如裂解、结合、洗涤和洗脱），可使用miRNeasy Serum/Plasma Kit进一步纯化高品质RNA。

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