一步法96 孔板单菌落质粒DNAout（ 真空法）1次效果

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 真空法)1次效果特点：
1. 常温保存时间长达半年，方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛，适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠，提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳（因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的，80801B 包装含 200 只专用拭子）。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout（CAT#：80801）提取其 DNA，从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存，Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 真空法)1次效果导致核酸降解的常见非酶因素原因：
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 真空法)1次效果使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟，弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中，用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中，剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟，将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意：转移的液体不要超过 25 mL，否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染，Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色，中间层为白色，含有 DNA，蛋白质和其他细胞破碎物，避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C，充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中，每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中，加入 1mL RNA 洗脱液，室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子（BioTechniques，28：414，2000）。
14. RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度（1 OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。

蛇毒因子(CVF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human insulin autoantibodies (IAA) ELISA Kit 人胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒

humanhepatitisEvirusIgG,HEV-IgGELISAKit 人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanGrowthHormoneBindingProtein,PELISA试剂盒人生长激素结合蛋白(P)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织酶1(PON1)内酯酶活性比色法定量检测试剂盒

HumanMetallothionein2，MT2ELISAKit人金属硫蛋白2(MT2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠补体成分4a(C4a)ELISA试剂盒 ，英文名： C4a ELISA Kit

Human alpha galactosidase (alpha GAL) ELISA Kit 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA试剂盒

RatTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TSGFELISAKit 大鼠特异生长因子/相关因子(TSGF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCOX-2(ratcyclooxygenase-2)ELISAKIT大鼠环加氧酶2规格：48T/96T

细胞一氧化氮合成酶总活性比色法定量检测试剂盒20次

ratCorticosterone,CORISAKit大鼠皮质同/肾上腺同(CORT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠雌二醇(E2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人免疫球蛋白G4(IgG4)免疫试剂盒 Human Immunoglobulin G4,IgG4 ELISA Kit

MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKit小鼠坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒规格：96T/48T

石蜡切片组织APC蛋白表达CDK2显色光学显微镜检测试剂盒10/20次

Humanpro-opiomelanocortin,POMCELISA试剂盒人阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanthrombospondin1，TSP-1ELISAKit人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6-10B, 人鼻咽癌细胞系 Human

人永生化表皮细胞;HaCaT

CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

大鼠肝细胞;BRL 3A 胆管细胞型肝癌细胞，HCCC-9810细胞 C26细胞，小鼠结肠癌

小鼠海马趾神经元MN-h

CES Others Mouse 小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

TRIB2 Others Human 人 TRIB2 / TRB2 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)

小鼠成肌细胞;C2C12

Lec1细胞，卵巢细胞 人肝癌细胞,FL62891细胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

ZG仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1

POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人细胞裂解 (阳性对照) (

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0386MPC-11(小鼠浆细胞瘤)5×106cells/瓶×2

小鼠气管平滑肌细胞完全培养基 100mL

EJ人膀胱癌细胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(单核细胞白血病)

CL-0386MPC-11(小鼠浆细胞瘤)5×106cells/瓶×2

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

小鼠气管平滑肌细胞完全培养基 100mL

EJ人膀胱癌细胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(单核细胞白血病)

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 真空法)1次效果CD38 Others Human 人 CD38 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

脐带单核细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)

H9c2细胞，大鼠心肌细胞 人肝癌细胞,HepG2/2-15细胞 CL-0128JeKo-1(人套细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2

二氢叶酸还原酶缺陷型ZG仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-

小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)

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