BL21（DE3） 化学感受态细胞0.1mL×10介绍

BL21(DE3) 化学感受态细胞0.1mL×10介绍产品及特点：

BL21(DE3) 化学感受态细胞0.1mL×10介绍本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
BL21(DE3) 化学感受态细胞0.1mL×10介绍规格及成分：

BL21(DE3) 化学感受态细胞0.1mL×10介绍使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

MFC 小鼠胃癌细胞

CL-0277HCC94(人鳞癌细胞(高分化))5×106cells/瓶×2

人肺成纤维细胞 (HPF)( 5×105 )

人肺粘上皮样癌细胞;NCI-H292 大鼠表皮色素细胞完全培养基 100mL

人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1

TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

兔间变表皮鳞癌瘤株;VX2

人前列腺上皮细胞(HPEpiC)(5×105)

CL-0131KB(人口腔表皮样癌细胞)5×106cells/瓶×2

人非小细胞肺癌细胞;NCI-H23 大鼠视网膜muller细胞 100mL

A549/DDP 肺腺癌/顺铂耐药株

HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2

多聚赖氨酸 1 mg/mlPLL

Ovary细胞，人卵巢癌细胞 兔成骨C细胞,IF细胞 胎盘滋养层细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

FO(小鼠瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HRCEpC Pellet 人肾皮质上皮细胞团块 > 1 mio.cells 人晶状体上皮细胞cDNAHLEpiC cDNA

CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2

DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

多聚赖氨酸 1 mg/mlPLL

Ovary细胞，人卵巢癌细胞 兔成骨C细胞,IF细胞 胎盘滋养层细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

FO(小鼠瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HRCEpC Pellet 人肾皮质上皮细胞团块 > 1 mio.cells 人晶状体上皮细胞cDNAHLEpiC cDNA

盐增菌液(SF)250g用于增殖标本中的沙门氏菌

GC琼脂 250g 用途:用于淋球菌的分离培养。

钠三糖铁 NaCl Triple Sugar Iron Agar 250 用于副溶血性弧菌的生化反应筛选(SN标准)

5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶

BoltonBrothSupplement

乙基紫肉汤250g用于链球菌的增菌培养。

VJ琼脂 分离样品中凝固酶阳性、甘露醇发酵的金黄色葡萄球菌 500g incubation media VJ琼脂 分离样品中凝固酶阳性、甘露醇发酵的金黄色葡萄球菌 500g

产紫青霉 支/瓶

7.5%NaClBroth

MartinAgarMedium,Modified

Liquidmedium

16010-142 1000ml incubation media 16010-142 1000ml

玖红穗状霉 食用 支/瓶

菌种保存和即用型运送培养基

曙红亚甲基蓝琼脂培养基(EMB) 250g 弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌

BL21(DE3) 化学感受态细胞0.1mL×10介绍半固体琼脂26050250g供细菌动力观察、菌种保存，H抗原位相变异试验等。(美国FDA、SN、GB)

4101-prf EpiCM-prf 上皮细胞培养基 500 ml incubation media 4101-prf EpiCM-prf 上皮细胞培养基 500 ml

胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB) 300ml/袋*10 用于药品YJ剂效力检测中细菌检测

6.5%NaCl葡萄糖琼脂250g用于肠球菌高盐耐受生长试验

NTMMedium