TG1 化学感受态细胞0.1mL×10实验步骤

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10实验步骤产品及特点：

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10实验步骤本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
TG1 化学感受态细胞0.1mL×10实验步骤规格及成分：

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10实验步骤使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

Lewis 小鼠肺癌细胞

CL-0304PC-3M(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2

人支气管上皮细胞(HBEpiC)(5×105 )

人胃癌细胞;MKN-45 大鼠表皮角质形成细胞完全培养基 100mL

人胚肺成纤维细胞;MRC-5

EPOR Others Human 人 EPO Receptor / EPOR 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]

人少突胶质前体细胞(HOPC)(贴壁生长)

原代滑膜皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml

人内膜腺癌细胞;HEC-1-B 大鼠颈上皮细胞完全培养基 100mL

F9 小鼠畸胎瘤细胞

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

PILRB Others Mouse 小鼠 PILRB1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0031BEL-7402(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠内膜上皮细胞完全培养基 100mL

H1650-M3人非小细胞肺癌细胞 H1650-M3 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS

IL10 Protein Human 重组人 IL10 / Interleukin-10 蛋白

SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 U937(组织细胞淋巴瘤)

CL-0031BEL-7402(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2

PILRB Others Mouse 小鼠 PILRB1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

小鼠内膜上皮细胞完全培养基 100mL

H1650-M3人非小细胞肺癌细胞 H1650-M3 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS

IL10 Protein Human 重组人 IL10 / Interleukin-10 蛋白

SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 U937(组织细胞淋巴瘤)

DextroseSemisolidMedium

AHM鉴别培养基 250g 用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别

马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA) Potato Dextrose Agar 250 用于霉菌、酵母菌计数(GB标准)

TBX显色培养基l/瓶用于大肠杆菌快速检测，24h内出结果，大肠杆菌显蓝色incubationmediaTBX显色培养基l/瓶用于大肠杆菌快速检测，24h内出结果，大肠杆菌显蓝色

含100mlBolton肉汤均质袋 10个/包 用于空肠弯曲菌的增菌培养

乙酰胺肉汤250g用于铜绿假单菌产试验

匹克氏肉汤基础B Pick’s Broth Base B 用于一次性使用卫生用品中溶血性链球菌的检验

UBA培养基 UBA Medium 250克 啤酒中厌氧菌检测

TTC溶液(0.2ml*于HB0incubationmediaTTC溶液(0.2ml*于HB0127中

BrainHeartInflusionBroth

改良frey氏培养基250g用于培养滑液支原体及其他禽支原体用。

15140-122 100ml incubation media 15140-122 100ml

链霉菌 用作菌肥。 支/瓶

Eosin-MethyleneBlueAgar

沙氏葡萄糖肉汤(SDB) 250g 用于霉菌和酵母菌的增菌培养

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10实验步骤动力-吲哚-尿素培养基基础(MIU)250g用于细菌的复合生化试验

AHMMedium

钠蔗糖琼脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 250 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)

5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶

BoltonBroth