免质粒提取筛选试剂盒1000 次供应

免质粒提取筛选试剂盒1000 次供应规格及成分：

免质粒提取筛选试剂盒1000 次供应产品及特点：

本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

伊红Y二钠盐,水溶性
衣霉素溶液
Toluene（甲苯）
甲胂酸钠缓冲液，0.4M，pH7.2
Romeis固定液
Heidenhain苏木精染色液
Gonnor 甲酚紫酸性复红法肌肉组织染色试剂盒
Loyez 苏木素染色法神经组织染色试剂盒
Schaffer硫堇法软骨组织染色试剂盒
Spicer高铁二胺染色法粘多糖染色试剂盒
16 酶显色
Machiavello复红染色法立克次体染色试剂盒
AMPSO Buffer，0.2M，pH8.5
CAPS Buffer,0.5M,pH10.5杆菌属 Lactobacillus sp.
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NCI-H716(人结直肠腺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis
蜜黄马杜拉放线菌 Actinomadura chelvata
人肌肉组织来源细胞英文名称：HMF
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
褐单梗曲霉 Ochrobactrum anthropi
球菌属 Lactococcus sp.
苜蓿中华根瘤菌
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺细胞系
无花果曲霉 Aspergillus ficuum
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes
田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans
Ana-1(小鼠巨噬细胞)5×106cells/瓶×2
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans
DNA洗脱液（10 mL）
Hanks' Balanced Salt Solution
Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered]
MOPS Buffer,1.0M,pH6.0