人纤维母细胞表面抗原（FSP）ELISA试剂盒

货号： WT-E2871 产品名称： 人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒

ELISA试剂盒基本原理

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体， 这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性， 又保留酶的活性。 在测定时， 把受检标本 （测定其中的抗体或抗原） 和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。 用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开， Z后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 加入酶反应的底物后， 底物被酶催化变为有色产物， 产物的量与标本中受检物质的量直接相关， 故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。 由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

方法类型和操作步骤

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

（一）双抗体夹心法

双抗体夹心法是检测抗原Z常用的方法， 操作步骤如下：

（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。

（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。 洗涤除去其他未结合的物质。

（3）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。

（4） 加底物： 夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。 根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。根据同样原理， 将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物， 即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。

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