XTY5112533 盐酸克仑特罗(瘦肉精)检测试剂盒
- 型号:XTY5112533
- 产地:北京
- 供应商:轩泰仪(北京)科技有限公司
- 供应商报价: 1.00¥
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| 商品编号:XTY5112533 商品名称:盐酸克仑特罗(瘦肉精)检测试剂盒 |
| 详细介绍: |
盐酸克仑特罗(瘦肉精)检测试剂盒 样品处理 样品处理方法1 组织、肉样(纯精肉)、内脏样品的处理方法: 1.称2克匀浆过的样品加入2 mL溶液1(无色无味),搅拌或震荡样品,使之混合均匀。 2. 加入6 ml溶液2(淡黄色,具刺激性气味),推荐用干净的卫生筷或竹签搅拌样品5分钟;或振荡15分钟,使其均匀分布于溶液中。 3.3000g离心10分钟。 4. 取3ml上清液于干净平皿中,60℃恒温箱蒸干(30分钟左右);也可在试管中直接水浴加热蒸干。 5.残留物用1ml 溶液2 (无色无味) 冲洗溶解。 6.3000g离心10分钟。 7.取清亮中间部分50ul直接加样, ELISA进行分析。 注:如果不慎将溶液弄到皮肤上,请立即用75%的医用酒精棉花擦拭,并用清水冲洗。切勿饮用及溅入眼睛。 样品处理方法2 (更快速) 1、称2克匀浆过的样品加入2 mL溶液1(无色无味),搅拌或震荡样品,使之混合均匀。 2、加入4mL溶液2 (淡黄色,具刺激性气味),强烈振荡,肉样约2分钟,组织约6分钟。 3、3000g离心5分钟。 4、取1 ml上清液于干净平皿中,70℃~80℃恒温箱蒸干(约需5分钟左右)。或用电吹风,只需3分钟。 5、残留物用0.5 ml 溶液3 (无色无味) 冲洗,将底部白色残留物全部洗入溶液。 6、取洗脱液50ul作检测用。 酶标免疫分析程序 1. 测定之前注意事项 a) 使用之前将所有试剂回升至室温20-25℃ b) 使用之后立即将所有试剂放回2-8℃ c) 在使用中不要让微孔干燥 d) 在ELA分析中的重复性,很大程度上取决于洗板的一致性,仔细按照推荐的洗板顺序操作是ELA测定程序中的要点 e) 在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖子盖住微孔板 2.酶标记物与微孔板条 a) CLE- 酶标记物 提供的CLE- 酶标记物为浓缩液。由于稀释的酶标记物稳定性不好,所以只稀释实际需用量的酶标记物1:14稀释(1μl酶标液加14μlPBS)。在吸取浓缩液之前,要仔细地振摇,剩余的仍放置2-8℃保存。 b)微孔板条 取出需用数量的微孔板及框架,将不用的微孔板用胶带封好,放进原袋中重新密封,4℃或-20℃保存,谨防受潮。 3. 标准液 提供的CLE标准液浓度为0, 0.1, 0.3, 0.9, 2.7, 8.1ppb(ng/ml) 4. 测定程序(室温25℃条件下操作) a) 剪开铝箔袋,将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架,标准和样品做两个平行实验,记录下标准和样品的位置。加入20μl的标准液或处理好的样品到各自的微孔中。如果微孔板条一次实验用不完,放回原铝箔袋中封紧,再套一个塑料自封袋夹紧后4℃或-20℃保存,切忌受潮。 b) 加入100μl稀释的酶标记物到微孔底部,25℃孵育30分钟(推荐使用恒温箱)。 c) 倒出孔中的液体,将微孔架倒置在吸水纸上拍打(每行拍打3次)以保证完全除去孔中的液体,用250μl PBST充入孔中,再次倒掉微孔中液体,再重复操作两次。每次洗板应加入洗液后等2分钟再倒掉。推荐使用洗瓶洗板,这样可加快速度,避免板条间的孵育时间不一致而产生OD值的差异。 d) 反应底物与显色试剂以1:1混合后加入100μl到微孔中,充分混合并在25℃暗处孵育15分钟。 e) 加入50μl反应停止液到微孔中,混合好在450nm 处测量吸光度值,必须在加入停止液后10分钟内读取光度值。 结果 所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以一个标准(0标准)的吸光度值再乘以100,因此0标准等于并且以百分比的形式给出吸光度值。 标准的吸光度值(或样品) ----------------------- ×100 = %吸光度值 0标准的吸光度值 计算的标准值绘成为一个对应CLE浓度(ng/g,或ng/ml)的半对数坐标系统曲线图,校正曲线在0.2-2ng/g(ppb)范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度(ng/g, 或ng/ml)可以从校正曲线上读出。 灵敏度 克伦特罗测定试剂盒的平均检测下限约为0.1ng/g(0.1ppb)。 特异性 与克伦特罗类似物的交叉反应: 克伦特罗(Clenbuterol) 溴布特罗(brombuterol) 110% 塞布特罗(cimbuterol ) 40% 马喷特罗(mapenterol) 17% 马布特罗(mabuterol) 16% 沙丁胺醇(salbutamol) 9% 妥布特罗(tulobuterol) 2% 特布他林(terbutalin) 2% 莱克多巴胺 <1% 异丙肾上腺素(Isoproterenol) <1% 肾上腺素(Adrenalin ) <1% 去甲肾上腺素(Noradrenalin) <1% 回收率 回收率为90%±15% |