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XTY5112533 盐酸克仑特罗(瘦肉精)检测试剂盒

产品信息
商品编号:XTY5112533 商品名称:盐酸克仑特罗(瘦肉精)检测试剂盒
详细介绍:

盐酸克仑特罗(瘦肉精)检测试剂盒


样品处理

    样品处理方法1

      组织、肉样(纯精肉)、内脏样品的处理方法:

1.称2克匀浆过的样品加入2 mL溶液1(无色无味),搅拌或震荡样品,使之混合均匀。

2. 加入6 ml溶液2(淡黄色,具刺激性气味),推荐用干净的卫生筷或竹签搅拌样品5分钟;或振荡15分钟,使其均匀分布于溶液中。

3.3000g离心10分钟。

4.  取3ml上清液于干净平皿中,60℃恒温箱蒸干(30分钟左右);也可在试管中直接水浴加热蒸干。

5.残留物用1ml 溶液2 (无色无味) 冲洗溶解。

6.3000g离心10分钟。

7.取清亮中间部分50ul直接加样, ELISA进行分析。

注:如果不慎将溶液弄到皮肤上,请立即用75%的医用酒精棉花擦拭,并用清水冲洗。切勿饮用及溅入眼睛。

     样品处理方法2                  (更快速)

1、称2克匀浆过的样品加入2 mL溶液1(无色无味),搅拌或震荡样品,使之混合均匀。

2、加入4mL溶液2 (淡黄色,具刺激性气味),强烈振荡,肉样约2分钟,组织约6分钟。

3、3000g离心5分钟。

4、取1 ml上清液于干净平皿中,70℃~80℃恒温箱蒸干(约需5分钟左右)。或用电吹风,只需3分钟。

5、残留物用0.5 ml 溶液3 (无色无味) 冲洗,将底部白色残留物全部洗入溶液。

6、取洗脱液50ul作检测用。

酶标免疫分析程序

1. 测定之前注意事项

   a)  使用之前将所有试剂回升至室温20-25℃

   b)  使用之后立即将所有试剂放回2-8℃

   c)  在使用中不要让微孔干燥

   d)  在ELA分析中的重复性,很大程度上取决于洗板的一致性,仔细按照推荐的洗板顺序操作是ELA测定程序中的要点

   e)  在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖子盖住微孔板

2.酶标记物与微孔板条

   a) CLE- 酶标记物 提供的CLE- 酶标记物为浓缩液。由于稀释的酶标记物稳定性不好,所以只稀释实际需用量的酶标记物1:14稀释(1μl酶标液加14μlPBS)。在吸取浓缩液之前,要仔细地振摇,剩余的仍放置2-8℃保存。

   b)微孔板条  取出需用数量的微孔板及框架,将不用的微孔板用胶带封好,放进原袋中重新密封,4℃或-20℃保存,谨防受潮。

3. 标准液    提供的CLE标准液浓度为0, 0.1, 0.3, 0.9, 2.7, 8.1ppb(ng/ml)

4. 测定程序(室温25℃条件下操作)

   a) 剪开铝箔袋,将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架,标准和样品做两个平行实验,记录下标准和样品的位置。加入20μl的标准液或处理好的样品到各自的微孔中。如果微孔板条一次实验用不完,放回原铝箔袋中封紧,再套一个塑料自封袋夹紧后4℃或-20℃保存,切忌受潮

   b) 加入100μl稀释的酶标记物到微孔底部,25℃孵育30分钟(推荐使用恒温箱)。

   c) 倒出孔中的液体,将微孔架倒置在吸水纸上拍打(每行拍打3次)以保证完全除去孔中的液体,用250μl PBST充入孔中,再次倒掉微孔中液体,再重复操作两次。每次洗板应加入洗液后等2分钟再倒掉。推荐使用洗瓶洗板,这样可加快速度,避免板条间的孵育时间不一致而产生OD值的差异。

   d) 反应底物与显色试剂以1:1混合后加入100μl到微孔中,充分混合并在25℃暗处孵育15分钟。

   e) 加入50μl反应停止液到微孔中,混合好在450nm 处测量吸光度值,必须在加入停止液后10分钟内读取光度值。

结果

     所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以一个标准(0标准)的吸光度值再乘以100,因此0标准等于并且以百分比的形式给出吸光度值。

               标准的吸光度值(或样品)

              ----------------------- ×100 =  %吸光度值

                    0标准的吸光度值

计算的标准值绘成为一个对应CLE浓度(ng/g,或ng/ml)的半对数坐标系统曲线图,校正曲线在0.2-2ng/g(ppb)范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度(ng/g, 或ng/ml)可以从校正曲线上读出。

灵敏度

     克伦特罗测定试剂盒的平均检测下限约为0.1ng/g(0.1ppb)。

特异性

   与克伦特罗类似物的交叉反应:

      克伦特罗(Clenbuterol)                                            

      溴布特罗(brombuterol)            110%

      塞布特罗(cimbuterol )              40%                            

      马喷特罗(mapenterol)              17%

      马布特罗(mabuterol)               16%                                     

      沙丁胺醇(salbutamol)               9%

      妥布特罗(tulobuterol)               2%                                                                      特布他林(terbutalin)                 2%

      莱克多巴胺                             <1%                       

     异丙肾上腺素(Isoproterenol)       <1%

      肾上腺素(Adrenalin )                <1%                                   

     去甲肾上腺素(Noradrenalin)         <1%

回收率 

       回收率为90%±15%

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