黄热病毒IgG抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）
使用说明书
[产品名称]
通用名称：黄热病毒IgG抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Diagnostic Kit for Yellow fever virus IgG antibody（ELISA）
[包装规格]
96人份/盒
[用途]
黄热病毒（YFV）IgG抗体诊断试剂盒适用于定性测定人血清或血浆中黄热病毒IgG抗体，可作为黄热病毒早期感染的临床诊断指标之一。
[检验原理]
本试剂盒采用双抗体夹心法，在预包被鼠源单抗-黄热病毒特异性抗原复合物的反应孔内加入待测标本，若标本中有抗CHIV，则可在微孔板表面形成抗原-抗体复合物，再与酶标二抗结合，形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，经显色系统显色后，根据OD值判定有无YFV抗体的存在。
[试剂盒组成]
- 预包被反应板 96孔×1块
- 酶结合物 6ml×1瓶
- YFV阴性对照 0.5ml×1瓶
- YFV阳性对照 0.5ml×1瓶
- 浓缩洗涤液 30ml×1瓶
- 样品稀释液 30ml×1瓶
- 显色剂A、B液 各6ml×1瓶
- 终止液（2M H2SO4） 5ml×1瓶
- 说明书 1份
[储存条件及有效期]
试剂盒应置2-8℃中避光保存，有效期12个月。
[适用仪器]
- 微量移液器和洁净的吸头
- 37℃恒温箱或水浴锅
- 计时器
- 洗板机
- 振动器
- 酶标仪 检测波长450nm，参考波长630nm。
[样本要求]
- 样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术收集血液，全血标本Z好先放置37℃处理2小时，3000转/分钟离心10分钟以上，使血清（浆）不含或极少含血细胞。如果为抗凝血样本，样本离心后，再室温放置2小时以上。
- 样品可以使用血清或者血浆，柠檬酸，肝素或EDTA等抗凝剂不会影响实验结果。
- 样品中含用叠氮钠会影响实验的结果，高度溶血的样品、没有完全收缩的血清样品或者有微生物污染的样品可能会引起错误结果。
- 新鲜的样品在2-8℃无菌条件可保存一个星期，新鲜样品可长期贮存-20℃或以下，避免反复冻融。
[检验方法]
- 从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同样将浓缩洗涤液做1:20稀释。
- 待测样本用样本稀释液1:1000稀释，每孔加入100μl，并设阴性对照、阳性对照各2孔，分别加入阴、阳性对照100μl，再设空白对照1孔，置37℃温浴60分钟，弃去孔内样本，拍干。
- 洗板：
- 手工洗板：弃去反应板条孔内液体，在吸水纸上拍干；用洗涤液注满每孔，勿溢出，静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
- 洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，洗液盈注满每孔，并确保每次吸净无残留，Z后在吸水纸上拍干。
- 每孔加酶结合物100μl，空白对照孔不加，贴上胶纸，置37℃孵育30分钟，同上洗板5次。
- 每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，置37℃避光孵育15分钟。
- 每孔加入终止液50μl终止反应，空白调零，在酶标仪中读取各孔OD值（450nm/630nm）。
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