人巨核细胞保白血病细胞，Dami 细胞

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• 如何选用培养基？ 
  培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件： 
  细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 
  293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清 
  3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清 
  A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10%胎牛血清 
  AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 
  BALB/3T3 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  BHL-100 上皮细胞 人 乳房 McCoy', 10% 胎牛血清 
  BT 成纤维细胞 牛 鼻甲骨细胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA 
  Caco-2 上皮细胞 人 结肠腺癌 MEM, 20% 胎牛血清 和NEAA 
  Chang 上皮细胞 人 肝脏 BME, 10% 小牛血清 
• Clone 9 上皮细胞 大鼠 肝脏 F-12K, 10% 胎牛血清 
  Clone M-3 上皮细胞 小鼠 黑素瘤 F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 
  COS-1 成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% 胎牛血清 
  COS-3 成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% 胎牛血清 
  COS-7 成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% 胎牛血清 
  CRFK 上皮细胞 猫 肾 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  CV-1 成纤维细胞 猴 肾 MEM, 10% 胎牛血清 
• H9 成淋巴细胞 人 T细胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% 胎牛血清 
  HaK 上皮细胞 仓鼠 肾 BME, 10% 小牛血清 
  HCT-15 上皮细胞 人 结肠直肠腺癌 RPMI-1640, 10% 胎牛血清 
  HEp-2 上皮细胞 人 喉 癌 MEM, 10% 胎牛血清 
  HL-60 成淋巴细胞 人 早幼粒细胞白血病 RPMI-1640, 20% 胎牛血清 
  HT-1080 上皮细胞 人 纤维肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和NEAA 
  HT-29 上皮细胞 人 结肠腺癌 McCoy's , 10% 胎牛血清 
  HUVEC 内皮细胞 人 脐带 F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素盐 100 ug/ ml 
  I-10 上皮细胞 小鼠 睾丸癌 F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 
  IM-9 成淋巴细胞 人 瘤病人 RPMI-1640, 10% 胎牛血清 
  JEG-2 上皮细胞 人 绒毛膜癌 MEM, 10% 胎牛血清 
  Jensen 成纤维细胞 大鼠 肉瘤 McCoy's , 5% 胎牛血清 
  Jurkat 成淋巴细胞 人 淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清 
  K-562 成淋巴细胞 人 性的白血病 RPMI-1640, 10% 胎牛血清 
  KB 上皮细胞 人 口腔癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  KG-1 白细胞 人 红白血病病人 IMDM, 20% 胎牛血清 
  L2 上皮细胞 大鼠 肺 F-12K, 10%胎牛血清 
  L6 大鼠 骨骼肌成肌细胞 DMEM, 10% 胎牛血清 
  LLC-WRC 256 上皮细胞 大鼠 癌 Medium 199, 5% 马血清 
  McCoy 成纤维细胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清 

如何消除组织培养的污染？

当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。
高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。
1 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。
2 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗生素加入到每一个孔中。例如，两性霉素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
3 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。
4 确定抗生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2－3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2－3代。
5 在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
6 重复步骤4。
7 在无抗生素的培养基中培养4－6代，确定污染是否以已被消除。

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