荧光定量PCR技术服务-定量

产品信息

定量（Absolute Quantification，AQ）

分析用于确定未知样本中某个核酸序列的量值，即通常所说的拷贝数，应用与病原体检测，转基因食品检测，及基因表达研究。

SYBR Green特性：

（1）只有和双链DNA结合后才发荧光。

（2）变性时，DNA双链分开，无荧光。

（3）在延伸结束阶段采集荧光信号。

（4）SYBR Green也能和非特异性的双链DNA结合发光，所以必须在反应结束时做熔解曲线分析。

TaqMan探针的特性：

（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等

（2）3′端标记有荧光淬灭基团（Quencher, Q）

（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收，无荧光， R与Q分开，发荧光（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针。

定量的标准样品：

（1）含有和待测样品相同扩增片段的克隆质粒

（2）含有和待测样品相同扩增片段的cDNA

（3）PCR的产物，可分别做系列稀释。

服务流程：

步骤	客户提供	服务内容	基屹提供
1	新鲜的且尽量多的材料；已知的全长基因序列；尽可能详细的背景资料：DNA/ RNA来源、丰度等。	DNA/RNA提取，根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针。
2	纯化好的DNA/RNA（大于5 ug/样品）；已知的全长基因序列；尽可能详细的背景资料：DNA/ RNA来源、丰度等。	根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针。
3		以DNA为模板，对目的基因进行荧光定量PCR检测分析	提供完整的定量分析结果、实验荧光定量扩增曲线及详细的实验步骤。

注意：客户可根据所能提供的起始材料不同，选择从步骤1或2启动项目。

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