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SDS裂解液 NobleRyder P0912;沈阳供应SDS裂解液 ...

产品信息

SDS裂解液 NobleRyder P0912

北京诺博莱德科技有限公司供应SDS裂解液 NobleRyder P0912量大优惠,咨询 :      1215878164

 

 产品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0912

SDS裂解液

100ml

220.00

    我们生产的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WesternChIP(染色质免疫共沉淀,chromatin immunoprecipitation)等。
    关于我们生产的不同的裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考附录。
    SDS裂解液的主要成分为50mM Tris(pH8.1)1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate25mM β-glycerophosphate1mM EDTA1mM Na3VO40.5 ug/ml leupeptin等多种YZ剂。可以有效YZ蛋白降解。
    SDS裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0912

SDS裂解液

100ml

 

PMSF100mM

1.5ml

说明书

1

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得Z佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索Z佳的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解SDS裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的Z终浓度为1mM
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWesternChIP等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP,建议6孔板每孔细胞至少加入200微升裂解液。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解SDS裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的Z终浓度为1mM
3. 按照每20毫克组织加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
4.
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWesternChIP等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品Pai包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, FermantasMBI, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。

 

 

SDS裂解液 NobleRyder P0912

 

 

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