12143 QIAGEN Plasmid Midi Kit

 QIAGEN Plasmid Kits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg （Mini）、100 μg （Midi）、500 μg （Maxi）、2.5 mg （Mega）或10 mg （Giga）的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。

传统的QIAGEN Plasmid Giga Kits应用重力流阴离子交换柱QIAGEN-tip 100 GX纯化质粒DNA，也单独提供QIAGEN-tips 100。 

* 实际产量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌、培养基和培养体积。
† 培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基。

原理

QIAGEN 独特的阴离子交换柱专用于核酸纯化，其的抽提性能可确保DNA纯度相当于甚至高于两次CsCl梯度离心的产物（见图"QIAGEN Plasmid kits制备超纯的质粒DNA）。预装的QIAGEN柱子以重力流方式纯化，不会流干，将质粒制备所需的手工操作时间降至Z少。整个质粒纯化系统避免了苯酚、氯仿、ethidium bromide和CsCl等有毒物质，将对用户和环境的危害降至Z低。

操作步骤

应用QIAGEN Plasmid Kits纯化过程中，通过离心取出细菌裂解液。然后将澄清的裂解液装入阴离子交换柱，在适当的低盐浓度和pH值条件下，阴离子交换柱会选择性地结合质粒DNA。RNA、蛋白质、代谢物和其他小分子杂质通过中盐浓度洗涤去除，应用高盐浓度缓冲夜洗脱超纯的质粒DNA。通过异丙醇沉淀浓缩并脱盐DNA，离心法收集DNA。

应用

QIAGEN Plasmid Kits 纯化所得的质粒DNA非常适合于诸如转染、克隆、手动或自动测序（包括毛细管测序）和体外转录等应用。