线粒体提取试剂盒 齐一现货供应

线粒体提取试剂盒

产品简介
线粒体提取试剂盒用于快速从动物细胞或组织中分离出完整、纯化的线粒体。线粒体的分离原理基本上采用：*，通过机械方法破裂细胞；第二，通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器；第三，通过高速差速离心获得线粒体。

适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞的线粒体的制备。获得的线粒体纯度较高，并且绝大部分分离获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能。可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶。

试剂盒以外自备仪器和试剂
低温高速离心机、剪刀、微量移液器、1.5m L离心管、涡旋振荡器、相差显微镜下、PBS

保存条件：

-20℃保存。

注意事项：

1、   全程低温操作，将样品管放在冰水浴而不是碎冰块中。

2、   微量制备比大规模制备操作更方便和快速，因而更容易获得完整的线粒体。

3、   在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的Z关键环节。与组织块相比，细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。在相差显微镜下检查未裂解细胞应在50%左右即可。过度研磨将破坏线粒体，研磨不足将降低得率。

4、   以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。

5、   进行Western Blot和2D电泳，可直接加入样品缓冲液裂解线粒体。

6、   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作规程

1、   样品的处理

A、  培养细胞裂解匀浆

a、    按照常规方法收集细胞。用PBS洗涤一次细胞并计数， 离心（2000rpm，5min）收集细胞，吸尽上清。每次提取需要5×107个细胞。

b、   加入1.5mL预冷的裂解液重悬细胞，冰浴放置10～15min。

c、  将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，冰浴的过程中用间隙严密的研杵研磨细胞30～40次。

（相差显微镜下检查未裂解细胞应在50%左右即可）

d、   转入第2步进行操作。

B、组织裂解匀浆

a、    称取100～200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干。

b、   把组织放在一个置于冰上的离心管或培养皿中，用剪刀或刀片把组织剪切成非常细小的组织碎片。

c、    加入1.5 mL冰预冷的裂解液，冰浴的过程中用间隙严密的研杵研磨细胞20次。

（相差显微镜下检查未裂解细胞应在50%左右即可）

d、   转入第2步进行操作。

2、   将细胞或组织匀浆物转移到预冷的离心管中，4℃，800×g离心5 min。细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞等在管底。

3、   在另一个新的预冷的离心管中预先加入0.5mL 溶液A，将匀浆后离心得到的上清液0.5mL（溶液A：上清液体积=1：1）沿管壁小心地加入含有溶液A的离心管中，覆盖于溶液A的上层。

4、    4℃离心（15,000×g 10 min）。离心后的上清为胞浆成分，将上清转移到新离心管，沉淀则为线粒体。

5、    往沉淀中加入0.2 mL漂洗液重悬线粒体沉淀，4℃离心（15,000×g 10 min），弃上清。

6、   用50 ～100μL储存液或合适的缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或?70 oC保存。

（加入储存液体积的估算：50 μL/每100 mg组织，100 μl/5 × 107个细胞）

线粒体提取试剂盒

齐一生物长期经营ELISA试剂盒及抗体（免费代测）、分子学生物试剂盒、金标法检测试剂盒、比色法检测试剂盒、细胞菌株、培养基、细胞因子、生化试剂、耗材等生物试剂产品。诚信经营，价格实惠，服务周到，质量保障！提供各种实验代测服务。欢迎新老客户！

线粒体提取试剂盒

其他相关产品如下：

Caspase 2 活性检测试剂盒    20次
Caspase 2 活性检测试剂盒    100次
Caspase 3 活性检测试剂盒    20次
Caspase 3 活性检测试剂盒    100次
Caspase 4 活性检测试剂盒    20次
Caspase 4 活性检测试剂盒    100次
Caspase 6 活性检测试剂盒    20次
Caspase 6 活性检测试剂盒    100次
Caspase 8 活性检测试剂盒    20次
Caspase 8 活性检测试剂盒    100次
Caspase 9 活性检测试剂盒    20次
Caspase 9 活性检测试剂盒    100次
CaspaseYZ剂Z-VAD-FMK(20mM)    20μl
Caspase 3YZ剂Ac-DEVD-CHO(10mM)    100μl
JC-1    1mg
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)    >100次
Rhodamine 123    5mg
Propidium Iodide/碘化丙啶    5mg
Propidium Iodide/碘化丙啶    20mg

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒    500次
中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒    500次
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒    100次
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒    500次
WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒    100次
WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒    500次
Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)    100次
Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)    500次
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒    2000次
CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针)    5mg

胰酶细胞消化液    100ml
胰酶细胞消化液(含酚红)    100ml
L-Glutamine(100X)    100ml
Hanks' Balanced Salt Solution    500ml
Hanks' Balanced Salt Solution(with Ca2+ & Mg2+)     500ml
7.5% NaHCO3溶液    100ml
PBS    500ml
D-PBS    500ml