货号：NR-E10004 牛肿瘤坏死因子-α ELISA 试剂盒（bovine TNF-α EL...

前沿简介：

     肿瘤坏死因子-α是一类主要由巨噬细胞分泌的多功能细胞因子，在炎症反应、细胞凋亡及免疫系统发育过程中起着关键作用。TNF-α主要由巨噬细胞分泌，但其他类型的细胞如CD4+淋巴细胞，NK细胞、神经元细胞也能够分泌。

灵敏度：6.3pg/mL   检测范围：125-8000 pg/ml 

分析时间：4h

样品类型：血浆、血清、细胞培养上清液

样品用途：此试剂盒只用于牛肿瘤坏死因子-α的检测

试剂盒保存温度：2-8℃

规格：96T

实验原理：

本试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中牛肿瘤坏死因子-α的水平。用纯化的牛肿瘤坏死因子-α抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入牛肿瘤坏死因子-α，再与牛肿瘤坏死因子-α抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛肿瘤坏死因子-α呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛肿瘤坏死因子-α浓度。

Elisa试剂盒实验注意事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

2.  加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，*个孔与Z后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间（包括标准品及所有样品）Z好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。

3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响Z后的酶标仪读数。

5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl），以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

     7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请Z后乘以稀释倍数。