细胞活性氧ROS分析试剂盒(H2DCFDA绿色荧光探针)规格_详细资料

产品信息

货号： BJ-15761
保存条件：低温冷藏
供应商：上海邦景
保质期：详见说明书
CAS号：详见说明书
英文名：详见说明书
数量： 27
规格： 1000T

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

产品名称：细胞活性氧ROS分析试剂盒(H2DCFDA绿色荧光探针)规格
英文名称：Cells Reactive oxygen species Analysis Kit
产品规格：1000T
发货周期：1～3天
本试剂盒提供还原型具有细胞膜透性的ROS荧光探针衍生物。还原型与乙酰化形式的2'，7'-二氯荧光素（DCF）是无荧光的乙酸酯基团，在胞内可以被酯酶氧化或水解，从而脱去，生成带电荷形式的探针。利用合适的激发光源可以很方便地在各种检测平台上观察测量，如流式细胞仪、荧光酶标仪和荧光显微镜。由于染料很容易受到光氧化，在进行实验时必须必须全程注意避光。
相比较其非羧基衍生物，羧基
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)Z好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。Z好在1h内检测。
注意事项：
细胞活性氧ROS分析试剂盒(H2DCFDA绿色荧光探针)规格尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
JWH 7 （5 mg）     1（1pentyl1Hindol3yl）2phenylethanone； JWH 7
Metamizole （sodium salt）（25 g）     Dipirona|Metamizol； 1[（2,3dihydro1,5dimethyl3oxo2phenyl1Hpyrazol4yl）methylamino]methanesulfonic acid, monosodium salt
L半胱氨酸盐酸盐一水物（100GM）     LCysteine， Hydrochloride， Monohydrate， CAS 700； MW 5.3； USP
AG1024 （1 mg）     2[[3bromo5（1，1dimethylethyl）4hydroxyphenyl]methylene]propanedinitrile； Tyrphostin AG1024|AGS 20AG1024
2，4Diamino6hydroxypyrimidine （250 mg）     2，4diamino6（1H）pyrimidinone； DAHP； 2，4Diamino6hydroxypyrimidine
3，4Dihydro5[4（1piperidinyl）butoxy]1（2H）isoquinolinone     DPQ
D正缬酸10克RT
(直链淀粉)
硬脂醇，英文名或英文缩写：1Octadecanol，级别：CP，98%，规格：25克
醌2磺醋内盐;银盐 cnthrcinoneonq2sulfonic ccid wo7ium sclt;Silvqr sclt;wo7ium cnthrcinoneonq2sulfonctq 1088
SHEATHSOLUTION,PRESERVATIVEFREE,8X鞘液,无防腐剂,8X高级RTsigma
1,6Hexanediamine25克5N
99酚蓝;四酚磺酞BroMopxenol blue
LLeucinolS(+)2基4甲基克BR，98%
2,5二甲氧基二氢 2,5Dimethoxy2,5dihydrofuran,97% 3327 25G 通用试剂
L谷酸钠 LGlutamic acid monosodium (900%) 22 100G 基酸
猪肉胨规格： 25kg 用途：用于培养基、生物发酵的原材料
猪心胨规格： 25kg 用途：用于培养基、生物发酵的原材料
猪明胶胨规格： 25kg 用途：用于培养基、生物发酵的原材料
猪脑心浸出物规格： 25kg 用途：用于培养基、生物发酵的原材料
细胞活性氧ROS分析试剂盒(H2DCFDA绿色荧光探针)规格GramStaining
Bordet-GengouAgarMedium
TBB 培养基 Tyrobutyricum Broth Base 250 用于乳酪产品中梭菌的计数(Merck方法)
MKTTn肉汤基础250g/瓶用于沙门氏菌选择性增菌(ISO)，每培养基中添加03生霉素4mgincubationmediaMKTTn肉汤基础250g/瓶用于沙门氏菌选择性增菌(ISO)，每培养基中添加03生霉素4mg
BCYE琼脂平板(9cm) 10个/包用于军团菌的选择性分离培养
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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